摘要

阿司匹林，乙酰水杨酸或2-乙酰氧基苯甲酸，具有羧酸官能团，因此更容易量化使用强碱如氢氧化钠。在大多数片剂镇痛药物配方中，阿司匹林通常与其他酸性的赋形剂或取代基结合或复合，这些赋形剂或取代基具有酸性基团，容易与氢氧化钠发生反应，因此在多组分阿司匹林片剂配方中，氢氧化钠不是定量阿司匹林的合适试剂。他们服用了六种不同的药片，这些药片都是由著名的制药公司生产的，含有阿司匹林作为活性物质。方法利用氢氧化钠作为量化的主要试剂包括很多化学计量的数学操作的滴定方法,而通过多元校正给了紫外可见光谱值较低的上限或下限之外我们& BP药典对标签索赔,而联用色谱技术，如气相色谱和高效液相色谱，在药典范围内提供了非常好的分辨率和非常精确的结果。

关键字

药典的限制;气相;高效液相色谱法;UV - VIS光谱学;滴定分析;阿斯匹林;赋形剂

介绍

药物配方的药物活性取决于药物分子的化学特性，因此，化学特性和定量组成的任何微小变化都可能导致治疗效果的巨大变化。阿司匹林是一种抗炎药物，具有外周镇痛和中枢神经系统镇痛作用，通过不可逆抑制血小板环加氧酶抑制血小板聚集，抑制血栓加氧酶A2的生成，缓解头痛、神经痛、风湿病，是一种强大的血小板聚集和血管收缩诱导剂。

阿司匹林过量有潜在的严重后果，可导致显著的发病率和死亡(图1)。轻度中毒患者经常出现恶心、呕吐、腹痛、嗜睡、耳鸣和头晕。较严重的中毒会出现较明显的体征和症状，包括体温升高、呼吸急促、呼吸性碱中毒、代谢性酸中毒、低血钾、低血糖、意识模糊、癫痫、脑水肿、幻觉和昏迷。服用过量阿司匹林最常见的死亡原因是由肺水肿引起的心肺骤停。因此，为了避免过量使用，适当的测定和定量技术来确定多组分药物剂量中阿司匹林的含量及其稳定性是非常必要、重要和值得赞赏的。

图1：阿司匹林结构:(物理状态:白色结晶粉末;Nature-Weakly酸性;分子formula-C_9.H_8.O._4.;分子量 - 180.157g / mol;熔点-135°C;沸点-140°C）。

已经提出了几种方法，用于使用所述的各种技术测定市售片剂中单独或联合剂量的阿司匹林含量[2-7]。还报告了一种基于液相色谱技术测定多组分药物中阿司匹林含量的具体分析方法[8]。还基于联用色谱技术[9,10]和通过多参数传感器的紫外分光光度流动[11]开发了更快速、更具体的方法。已经介绍了使用HPTLC方法测定组合剂型中阿司匹林和硫酸氢氯吡格雷的稳定性研究[12]但未考虑酸性赋形剂对最终测定的影响

滴定法或湿法分析的经典技术和紫外分光光度分析通常首选的质量控制检测阿司匹林在大多数制药和化学实验室，因为他们广泛的可用性，易于操作和成本效益[4]。这些药物分析技术大多以有效成分为主要目标，而对药物成分在药物制剂中发挥促进药物代谢活性和活性物质稳定性的其他作用的作用研究较少。本研究比较了用于分析和定量阿司匹林在不同的止痛剂配方的技术，并总结出最佳方法，可信赖，以提供良好的分辨率和最佳结果，在接受的药典限制。

材料和方法

用于研究的仪器和试剂

用于滴定分析的玻璃器皿，UV-VIS双光束岛津1800（tra-0%-400%），FT-IR 8101 M岛津分光光度计（4600-400 cm^－1）HPLC knauer [自动取样器3900 Comp。，列Li C18（ODS），Sonycate / Karlkotl振动器，UV-VIS检测器]。HPLC中使用的试剂是HPLC等级，而对于UV -VIS光谱双光束机的情况下，滴定法是分析级（AR）和光谱级。

药物样本

本研究所使用的六种含阿司匹林的药物样本均从市场内的各药房收集，报告见下表(表1)。

商品名	内容	制造商	收藏地点
阿斯波罗	阿司匹林250毫克	Pirimal有限公司第2E批出口2019年10月	皇家Pharm，Znz
	扑热息痛20毫克
海德彭	阿司匹林300毫克	爱丽斯化学工业有限公司BN.3l57出口ss11/17	Faud制药。ZNZ
	对乙酰氨基酚250毫克
	咖啡因30毫克
Ascard-75	阿司匹林75毫克	Atco Lab。有限公司BN。16047，EXP 04/19	皇家制药公司
Micropirin	阿司匹林350毫克	Piramal India，Ltd Exp 11/19	Winam制药。柯
	咖啡因20毫克
迪斯普林	阿司匹林350毫克	利洁时科尔曼印度有限公司Exp. 7/2019	Lemuma Pharm.KE
	柠檬酸35毫克
	CaCO3.105毫克
Dynasprin	阿司匹林60毫克	美国印度有限公司特急12/18	Lemuma Pharm.KE
	潘生丁75mg

表1:本研究中含有阿司匹林的药物样本

纯阿司匹林的制备:制备定量测定用纯阿司匹林[13]，经纯化、干燥、表征。

紫外-可见光谱纯阿司匹林原液的制备:称取50 mg充分干燥（2小时，105°C，在真空干燥器中冷却）的纯阿司匹林样品，转移至100 ml容量瓶中，添加70 ml 0.1N NaOH，在水浴上加热10分钟，冷却至室温，过滤（Whatmann滤纸编号41）使用0.1N将滤液进一步稀释至100mL，以获得50mg/100mL的浓度。

滴定分析用阿司匹林药物样品工作储备溶液的制备：十块每个药物粉和干放在烤箱里半小时,等量的50毫克阿司匹林干样品准确重量为100毫升容量瓶稀释标准氢氧化钠(0.093 n),在水浴加热10分钟,冷却至室温,过滤,滤液用0.093N NaOH进一步稀释至100 ml。

HPLC纯阿司匹林标准原液的制备:称重25mg纯阿司匹林，加入含有稀释剂的25ml容量烧瓶中（HPLC溶剂混合物的乙腈和甲酸[99：1]，使用稀释剂对标记制成的体积，得到浓度1mg / ml的储备溶液。

HPLC样品溶液的制备:每种药物各取20片，分别粉状，105℃干燥2小时，在干燥器中冷却，取相当于50 mg阿司匹林的量转入100ml容量瓶中加入稀释液，超声，用稀释液做刻度。

纯阿司匹林合成的定性分析

采用物理常数法、氯化铁法、酯化法和红外光谱法对纯阿司匹林进行了定性表征。

红外光谱研究：纯药物作为KBR微丸的光谱范围为4600 cm^－1- 400厘米^－1如下所示（图2）。3500厘米^－1-2500厘米^－1为羧酸- OH str, 1687处为羧酸的特征羰基。1577和1581的峰是芳香族碳双键，1300厘米^－1代表C-O str，1380厘米^－1表示CH3 sym弯曲，峰值为755 cm^－1代表。邻位取代芳香环C-H。峰值为1754厘米^－1代表羰基str。酯。与IR数据群的参考咨询的峰值分配确认阿司匹林。

图2：纯药物作为KBR微丸的光谱范围为4600 cm-1–400 cm^－1

氯化铁测试:0.5通用纯阿司匹林纳入10毫升试管,添加10毫升的5 n氢氧化钠,煮3分钟,冷却,加入10毫升的硫酸,白色沉淀,过滤,蒸馏水溶解在冷和添加1毫升氯化铁溶液深紫色颜色确认了阿司匹林的存在。

酯化的阿司匹林:将0.5克纯阿司匹林放入10毫升试管中，加入10毫升5N氢氧化钠，煮沸3分钟，冷却，加入10毫升硫酸，获得白色沉淀，过滤。向滤液中加入3毫升酒精和3毫升硫酸，然后加热。从反应中可感觉到的乙酸乙酯气味证实存在阿司匹林。

物理参数:符合性测试:白色结晶粉末，弱酸性，分子量140℃，分子质量C_9.H_8.O._4.exp E^1%\1厘米海里在^1%\1厘米24.35和E^1cm.海里在^1%\1厘米47.6。本研究，e^1cm.海里在^1%\1厘米24.35吸光度为0.487，因为它接近λ的报告值_马克斯λ = 296 nm_马克斯= 297.4 25.

从药物样本中鉴别阿司匹林:对药物样品进行了氯化铁试验和酯化试验，均得到阳性结果，证实了阿司匹林存在于每种药物中。

阿司匹林定量测定的程序

滴定分析:以酚酞为指示剂，用0.055N HCl滴定各原药溶液中多余的碱。

紫外光谱分析:用移液管从纯阿司匹林储备溶液中取出0.1 ml、0.2 ml、0.9 ml，放入10 ml容量瓶中，并使用0.1N NaOH稀释至刻度。在λ处记录每种溶液的吸光度_马克斯= 297.4海里。该过程重复三次，平均结果绘制校准曲线。将0.4ml每个药物储备溶液移液到10ml体积烧瓶中，并使用0.1N NaOH稀释至标记，并在λ下记录吸光度_马克斯= 297.4 nm来估算每一个的浓度。采用Microsoft excel将测量数据制成表格，并进行线性回归分析。

高效液相色谱法测定:从HPLC纯阿司匹林溶液中取不同体积(0 ml、1 ml、2 ml、6 ml)分别装入不同的10 ml容瓶中，用稀释剂稀释至10 ml，经0.45 μ m膜过滤器过滤后各稀释剂注射到HPLC中。流速1.9 ml/min，运行时间7分钟，进样量20µl，检测波长297.4 nm (UV-Visible检测器)。流动相采用高效液相色谱级正庚烷磺酸钠2 g，乙腈150 ml, DI水850 ml，用冰醋酸调节pH至3.4。山峰下的区域。每一种药物样品都是用相同的HPLC在相同的条件下对纯阿司匹林和记录的峰下面积进行定量。

结果

滴定法测定

下表2为药物样品中阿司匹林的定量测定结果。柠檬酸的影响也说明了，因为它也消耗氢氧化钠溶液的比例为3:1的化学计量。

商品名	无水柠檬酸消耗的0.093N NaOH的体积	滴定度值(毫升)	测定阿司匹林	标签声明	%的错误
阿斯波罗	-	22.6	229.34	250	-8.26％
海德彭	-	15.25	290.85	300	-3.05%
Ascard-75	-	41.5	71.14	75	-5.15%
Micropirin	-	5.95	368.5	350	5.20%
迪斯普林	5.87	5.32	324.8	350	-7.10％
Dynasprin	-	43.35	55.66	60	-7.20％

表2:药物样品中阿司匹林的定量测定

紫外可见光谱分析

下面(表3)显示了λ处的吸光度数据_马克斯= 297.4 nm为纯阿司匹林，其标准校正曲线数据(图3)

Sol.Piptd (ml)	总量(毫升)	浓缩的×10－3mg / ml.	吸光度1	吸光度2	吸光度3	Ycal	Y科尔	偏差
0．1	10	5.	0.095	0.156	0.139	０．１３	0.129193	0.000807
０．２	10	10	0.235	0.254	0.250	0.252488	0.252488	-0.00015
0．3	10	15	0.38	0.382	0.378	0.38	0.375783	0.004217
０．４	10	20.	0.475	0.472	0.481	0.476	0.499078	-0.02308
０．５	10	25	0.629	0.625	0.634	0.62933	0.622373	0.00696
0．6	10	30.	0.757	0.759	0.754	0.756667	0.745668	0.010999
0．7	10	35	0.886	0.872	0.891	0.883	0.868963	0.014037
0．8	10	40	0.988	0.978	0.998	0.988	0.992258	-0.00426
0．9	10	45	1.105	1.109	1.104	1.106	1.115553	-0.00955.

表3:纯阿司匹林的吸光度数据

将每种药物的15毫克至35毫克的不同数量的干粉状样品准确称量在手表玻璃上，转移到100ml的容量瓶中加入0.1N NaOH的标记，在水浴中煮沸10分钟，过滤，滤液用NaOH稀释至100ml。每种溶液取0.4 ml放入10ml容量瓶中，用0.1 N NaOH稀释至标记，然后记录λ的吸光度_马克斯= 297.4海里。所得结果如下表4所示。

所取库存量（毫升）	添加稀释剂的体积	总卷。	浓缩的。(毫克/毫升)轴	y轴下的面积
0.	0.	10	0.	0.
1	9.	10	0．1	55428.7
2	9.	10	0.2。	119041.9
3.	7.	10	0．3	145870.5
4.	6.	10	０．４	197056
5.	5.	10	０．５	241416.
6.	4.	10	0．6	306515.2

表4:估计使用校准曲线的阿司匹林（图3）

图3:纯阿司匹林的校准曲线

从样品中估计阿司匹林(样品重量:X gm;阿司匹林溶液浓度:Y mg/ml;阿司匹林的吸光度浓度:Z mg/ml;误差百分比:[(Y - z)/Y] × 100)。

基于HPLC仪器的估计

(图4)下图为0.5 mg/ml纯阿司匹林溶液的色谱图，流速为1.9 ml/min。

(表5)显示了用不同浓度的纯阿司匹林原液稀释后的峰下面积得到的结果。通过绘制阿司匹林浓度与峰下面积(Aup)的关系，标定曲线如下(图5)。将每个样品溶液注射到高效液相色谱机中，阐明其反映药物中阿司匹林含量的峰下面积，并借助校准曲线(图5)，测定制剂中阿司匹林含量的浓度。估算权重、误差百分比和回收率的一般计算方法如下表6所示:

图4:纯阿司匹林的色谱图

图5:阿司匹林浓度与峰值下面积(Aup)

所取库存量（毫升）	添加稀释剂的体积	总卷。	浓缩。（mg / ml）x轴	y轴下的面积
0.	0.	10	0.	0.
1	9.	10	0．1	55428.7
2	9.	10	0.2。	119041.9
3.	7.	10	0．3	145870.5
4.	6.	10	０．４	197056
5.	5.	10	０．５	241416.
6.	4.	10	0．6	306515.2

表5:不同浓度的纯阿司匹林原液稀释后的峰下面积

药物的名字	区域色谱峰下	浓度。(毫克/毫升)	Wt。 计算(毫克)	复苏 ％	错误 ％
阿斯波罗	685056	1．25	249	99.6	０．４
海德彭	719859.4	1.48	295	98.3	1．7
Ascard-75	169876.6	0.37	74.2	98.9	1．1
Micropirin	766038	1．7	340	97.1	2．9
迪斯普林	7824011	1．71	342	97.7	2．3
Dynasprin	145870.5	0．3	59.2	98.6	1．4

表6:显示峰下面积，Conc (mg/ml)，百分比误差和回收率

样品计算重量(Wt):

Wt꓿ [（样品浓度x100）/50]×100

误差%꓿ [（Wt-Stdnt-Wt）/Stdnt-Wt]×100

回收率%꓿ （Ws/Stdnt重量）×100

Stdnt。指标准重量*

讨论

根据所获得的数据，如下（表7）所示，估计中的高误差在滴定分析中实现比在UVVIS光谱或HPLC技术中的效率分析。估计中的高误差在滴定分析中实现比在UV-VIS光谱或HPLC技术中的滴定分析。在药物制剂基质中，除活性成分之外，还有化学添加剂，如粘合剂，稀释剂，崩解剂，稳定剂，润滑剂，着色和调味剂，载体和碱，主要有助于在我们的体机制中溶解药物活性，稳定性和药物识别[14]。其中一些化学添加剂和赋形剂具有酸性性质和官能团（-COOH），其特别估计，特别是在定量运动中使用强碱的同时使用强碱。它们的结构制剂和具有估计试剂（碱例如NaOH等）的平衡式等式是化学计量计算所必需的，以进行计量检查其干扰或估计阿司匹林导致定量误差，如在滴定测定的情况下。这确实是艰苦的运动，因为它涉及包含数学操纵和导致不可避免的错误的化学计量估计。因此，应避免涉及湿经典分析技术中的中和过程的这些方法，特别是在有酸性本质上酸性的赋形剂的情况下，尤其是令人沮丧的。

在紫外-可见光谱技术中，干扰主要发生在与被分析物吸收紫外线的同一区域的药物基质中有吸收电子而导致明显误差的情况下，如在药物基质中有羧基发色团的地普林片。尽管使用校准曲线进行定量估计，但误差是不可避免的，因为它与吸光度读数混合在一起。这种估计误差是可以避免的，如果实现，隔离活性分析物和量化。根据所获得的数据，高效液相色谱技术已被证明是最好的，具有很好的回收率。应力条件下阿司匹林的峰纯度测试表明，该方法具有稳定性、指示性和特异性。在阿司匹林的保留时间没有发现其他的峰，表明在配方中使用的赋形剂甚至它的降解产品，即使它存在，也不会干扰它的估计。质谱/气相色谱与高效液相色谱具有可比性，但由于提取和分离过程非常耗时费力。

商品名	高效液相色谱法误差百分比	紫外可见规范。%的错误	滴定分析误差百分比
阿斯波罗	-0.4	2	-8.26
海德彭	-1.7	6.	-3.05
Ascard-75	-1.1	-2.5	-5.15
Micropirin	-2.9	-2.7	5．2
迪斯普林	-2.3	-32.8	-7.1
Dynasprin	-1.4	4．8	-7.2

表7：给出了HPLC、UV-VIS、滴定法的误差百分比

建议书

然而，使用所有这些技术，如果在进行定量检查之前对安慰剂进行三次试验，以抵消任何干扰，则可以实现极好的恢复。多变量校准曲线帮助下的联用色谱技术已被证明是药物定量研究中最可靠的方法研究发现，制造商有必要指出赋形剂的性质，无论其是否酸性，并且应在文献插页上提供药物基质的定量分析数据。

参考文献

1. Thisted B，Krantz T，StrøomJ，索伦森MB（1987）在ICU治疗的177名连续患者中急性水杨酸盐自我中毒。Acta Anaesthesiologica Scandinavica 31：312-316。[Ref。]
2. Abu-Qare AW, abu - donia MB(2001)高效液相色谱法测定大鼠血浆和尿液中溴化吡啶斯的明、对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因的有效性。J Pharm Biomed Anal 26: 939-947。[Ref。]
3. 陈志强，陈志强(1996)镇痛药APC片的紫外光谱多组分分析。J Am Chem Soc 124: 26。
4. Sethi PD(2008)《制剂中药物的定量分析》^{理查德·道金斯}版,CBS出版商。[Ref。]
5. Remington JP，Gennaro Ar（1990）雷丁顿制药科学，彭尼萨瓦尼亚18^th版。[Ref。]
6. Szostak R，Mazurek S（2002）通过FT-拉曼光谱定量测定片剂中的乙酰水杨酸和对乙酰氨基酚。分析员127:144-148[Ref。]
7. 美国药典(1995)亚洲版。
8. Ramos Maros N，Aguirre Gomez F，Molinz Diaz A，Capitan Valvey LF（2001）液相色谱法在同时测定药物制剂中乙酰水杨酸、咖啡因、可待因、扑热息痛、吡哆醇和硫胺素中的应用。J AOAC Int 84:676-683[Ref。]
9. cal A, Değim, Tuncer I, Sayal, Ahmet, et al.(2008)高效液相色谱法快速同时测定制剂中乙酰水杨酸、扑热息痛及其降解产物和有毒杂质产物。土耳其医学杂志38:167-173。[Ref。]
10. Kumar SS，Jamadar LD，Bhat K，Musmade PB，Vasantharaju GS，等。（2010）阿司匹林的分析方法开发和验证。国际化学杂志2:389-399[Ref。]
11. Vidal AD, Reyes JFG, Barraes PO, Diaz AM(2002)紫外分光光度流动多参数传感器同时测定对乙酰氨基酚，乙酰水杨酸和咖啡因。肛门Lett 35: 2433-2447。[Ref。]
12. Damle MC，Sinha PK，Botra KG（2009）一种验证的稳定性，指示HPTLC方法，用于测定组合剂型中的阿司匹林和氯吡格雷二硫酸盐。欧亚J肛门化学4：152-160。[Ref。]
13. 阿斯匹林的合成:一般化学实验。J Chem Educ 75: 1261-1262。[Ref。]
14. 有机化合物的光谱鉴定。5.^th版。约翰·威利父子公司[Ref。]

在此下载临时PDF

条信息

文章类型:研究文章

引用:Anthony O, Moh 'd HS, Mataka MA, Juma A, Odalo OJ, et al.(2017)使用滴定法、光谱法和连苯色谱技术比较分析不同镇痛制剂中的阿司匹林。J Pharm Anal Insights 2(1): doi http://dx.doi.org/10.16966/2471-8122.113

版权:©2017 Anthony O等人。这是在创意公约归因许可的条款下分发的开放式文章，其允许在任何媒体中不受限制地使用，分发和再现，只要原始作者和来源被记入。

出版历史记录：

收到日期:2017年8月21日

接受日期:2017年9月5日

发表日期:2017年9月11日