摘要

生长衰竭在患有支气管肺发育不良(BPD)的早产儿中很常见。高氧是BPD的一种病因，可降低持续喂养的幼鼠肺蛋白合成。为了确定高氧诱导的营养敏感翻译调节激酶mTOR(哺乳动物雷帕霉素靶点)的改变是否有助于起始事件的减少，在暴露于24小时室内空气(RA)或95% O的4日龄Sprague Dawley大鼠幼鼠中，研究了食物刺激的mTOR活性和真核起始因子4F (eIF4F)组装₂(牛)。在16小时时，幼崽被母亲分开禁食8小时，然后喂食以牛奶为基础的配方奶粉或水。禁食可抑制RA和Ox动物中mTOR底物S6K1的磷酸化，但膳食喂养对两组动物均无影响。虽然禁食不能改变eIF4F组装，但喂食提高了两组eIF4F组装。在禁食和饲喂条件下，牛的多聚体聚集在起始阶段减弱。Ox在喂养60分钟后增加eIF2α磷酸化，这是mtor独立的启动抑制因子。这些发现表明，高氧对mtor介导的翻译起始调控几乎没有负面影响，并强调eIF2α是导致O蛋白合成能力下降的潜在因素₂治疗肺。

关键字

支气管肺的发育不良;氧过多;翻译;磷酸化

缩写

RA：室内空气;牛：95％氧气;MTOR：哺乳动物的雷帕霉素目标;BPD：支气管肺胆管发育不良;FSR：蛋白质合成的分数率;EIF：真核起始因子;梅特-Crna._我^见过:启动程序Methionyl-tRNA;4 e - bp1: eif4e结合蛋白1;S6Rp:核糖体蛋白S6;S6K1:核糖体蛋白S6激酶-1。

介绍

尽管新生儿营养管理取得了进展，但躯体和组织特异性生长缺陷在诊断为支气管肺发育不良(BPD)的早产儿中仍然是常见的，BPD是一种以肺泡表面积减少和异常毛细血管发育[1]为特征的新生儿慢性肺病。BPD肺结构改变导致肺功能下降，这种情况可能持续到儿童时期，并可能贯穿成人生活。在早产儿呼吸窘迫综合征的治疗过程中，暴露于高吸入氧浓度有可能挽救生命。然而，高氧，即在高于满足组织和器官需求所需的分压下给氧，因其阻碍新生动物肺生长的能力和在BPD发展中的病因作用而得到确认[3,4]。由高氧产生的自由基和活性物质有能力调节影响生长的重要细胞代谢功能，包括基因表达的翻译控制。在成年鼠肺内，高氧降低了蛋白质合成分数率(FSR)和蛋白质合成效率，但不改变肺总RNA或RNA/蛋白质含量[5]。在新生大鼠肺中，高氧在起始水平上抑制了整体mRNA翻译，并改变了调控mRNA/核糖体结合[6]的真核起始因子(eIF)的活性。

mRNA转化为蛋白质始于起始阶段，起始阶段需要mRNA与40S核糖体亚基结合形成43S起始前复合物，核糖体复合物扫描到起始密码子，Met-tRNA结合_我^见过(起始甲硫酰- trna)到40S核糖体亚基。所有核编码真核mRNA的5 '末端的7-甲基- gtp帽将40S核糖体亚基与mRNA结合通过eIF4F复合物，由帽状结合蛋白eIF4E、支架蛋白eIF4G和RNA解旋酶eIF4A[7]组成的异三聚体。eIF4E结合蛋白-1 (4E-BP1)抑制eIF4E结合5 ' -cap的调节。营养敏感激酶，哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)磷酸化4EBP1，释放eIF4E，形成活性eIF4G:eIF4E复合物[8]。Met-tRNA的结合_我^见过到40S核糖体亚基由eIF2[7]介导。以吸引Met-tRNA_我Met时，eIF2必须产生GTP，这一步由鸟苷酸核苷酸交换因子eIF2B[9]催化。eIF2 α亚基在丝氨酸上的磷酸化⁵¹稳定不活跃的gdp结合形式的eIF2B[10]。eIF2B的活性也由其催化ε亚基介导，ε亚基受糖原合成酶激酶3介导的磷酸化[11]调控。综上所述，转录起始调控既包括eIF4F复合物在5 ' -mRNA帽上的组装，也包括Met-tRNA的成功募集_我^见过eIF2。

在新生儿时期，快速的生长对应着高的蛋白质合成率。新生儿骨骼肌质量的增加与喂养[12]引起的蛋白质合成反应的增加直接相关。喂养也会增加新生儿肺的FSR，但幅度小于肌肉[13]。成熟乳、初乳和配方饲粮对初乳缺失的4-6日龄仔猪[13]的肺FSR几乎是其两倍。

在骨骼肌中，膳食喂养在30分钟内刺激多聚体组装，eIF4F组装(增加eIF4G:eIF4E结合)，以及4e - bp1和核糖体蛋白S6 (S6Rp)的磷酸化。病理条件也被证明会对蛋白质合成的翻译调控产生负面影响。脂多糖降低了糖酵解肌中的FSR，同时降低了eIF4G:eIF4E结合和磷酸化mTOR底物，4E-BP1和核糖体蛋白S6激酶1 (S6K1)，这表明mTOR活性的降低至少是蛋白质合成[15]减少的部分原因。

我们之前已经显示出暴露于95％的o₂在持续喂养的新生大鼠[6]中，减少蛋白质合成和多聚体聚集，同时增加eIF2α磷酸化。为了直接评估高氧对喂养诱导的蛋白质合成的影响，我们设计了目前的研究，以验证高氧不会改变喂养诱导的起始复合物组装或mtor介导的新生大鼠肺中mRNA翻译的假设。

方法

动物模型及条件

定时怀孕的Sprague Dawley大鼠在妊娠第14天(Charles River Laboratories, Boston, MA)被安置在标准的鼠笼中，直到分娩后第4天。同窝的幼崽在大坝之间被挤来挤去，每窝被淘汰的幼崽总数达到12只。在出生第4天，幼犬称重，窝仔被放置在有室内空气(RA)或95% O的有机玻璃室中₂(Ox)如前所述[6]。100% O交货₂使用计算机系统(BioSpherix Ltd.， OxyCycler a)持续调节通过一个小风扇和CO₂保持在< 0.5%。房间空气和O₂同时研究了暴露的动物。大坝提供了标准的鼠粮和水自由，光照12小时，并保持在26°C和75-80%的湿度。

在暴露于RA或Ox 16小时后，将幼犬称重并分成两组。第1组动物用RA或Ox(水坝饲养，n=3 /大气)饲养共计24小时。其余的幼崽被从大坝分离出来，以促使它们禁食，并被放入单独的笼子(n=9 /大气)，笼子内衬有标准的啮齿动物被褥，盖着37°C的水套保暖毯(Gaymar, Orchard Park, NY)。利用肺中S6K1的磷酸化作为mTOR活性指标的初步研究表明，需要8小时的分离才能减少S6K1的磷酸化。禁食后，幼犬喂食0.4 ml无菌水(水喂食，n=3 /大气压)或人类婴儿过早配方奶粉(24千卡/盎司)，使用连接在注射器上的24计喂食针(配方喂养，n=6 /大气压)。0.4 ml的体积是根据对母鼠的分析确定的近似新生胃的体积。喂食后，幼崽被放回各自的房间。水喂养的动物在30分钟后进行研究，配方喂养的幼鼠一半在30分钟和一半在60分钟进行研究。在这段时间内，将幼犬斩首并按[6]摘取肺。在一组幼崽中，也采集了右侧腓肠肌和整个肝脏。 To examine residual mTOR activity after fasting, a group of water-fed pups were treated with rapamycin [4 mg/kg, i.p. (LC Laboratories (Woburn, MA)] in 5% DMSO or an equivalent volume of DMSO vehicle 1 hour prior to placement in their respective atmosphere. Animal protocols were approved by the Institutional Animal Care and Use Committee at the Pennsylvania State University College of Medicine.

eIF4F组装

采用亲和层析法分离含eIF4E的蛋白复合物[6]。冻左肺粉使用冰冷,Dounce组织均质器和溶解在皮套裤裂解缓冲(40毫米消息灵通的PH值7.5,120毫米氯化钠,1毫米EDTA,焦磷酸10毫米,10毫米β甘油磷酸盐,40 mMNaF,原钒酸钠1.5毫米,0.1毫米PMSF,苯甲脒1毫米,1毫米德勤,0.3%的家伙)。100微克总肺蛋白与洗净的m⁷-GTP琼脂糖珠(GE Scientific, Piscataway, NJ)， 4°C孵育2小时。孵育后，将微珠制成颗粒，清洗，煮沸去除蛋白质复合物。亲和纯化的蛋白复合物通过电泳和eIF4E、eIF4G和4E-BP1抗体免疫印迹分离。免疫印迹是可视化通过使用Gene Gnome生物成像系统(Syngene Incorporated, Fredericksburg, MD)进行定量分析，并在相同条件下(RA和Ox)每一窝中发育eIF4E、eIF4G和4E-BP1的印迹。对于免疫印迹图，大量的动物和条件需要从同一凝胶[6]“粘贴”到一起。

免疫印迹

在10％BIS-TRIS（Invitrogen / Biosource，Carlsbad，Ca）上电泳分离等量的裂解缓冲蛋白在10％的凝胶（Invitrogen / Biosource，Carlsbad，Ca）中，并转移至PVDF膜[6]。将膜与以下抗体一起孵育：S6K1（Thr³⁸⁹)、S6rp (Thr235/236)、4E-BP1 (Thr .⁷⁰)、eIF4E、eIF4G、eIF2B和eIF2α(除S6Rp (Thr^235/236在1:20 00);Cell Signaling Technologies, Beverly, MA);S6K1和4E-BP1(分别为1:2500和1:10 000,Bethyl Laboratories, Montgomery, TX);eIF2α(Ser⁵¹)和eIF2Bε (Ser^535.）（1：1000; Invitrogen）;β-肌动蛋白（1：5000; Sigma Chemical，St.Louis，Mo）;和物种特异性辣根过氧化物酶 - 共轭二抗（1：5000; GE Scientific）。蛋白质表达在每个凝胶上标准化为β-肌动蛋白，并且磷酸化与计算的总蛋白质的比例。

多核糖体分析

使用蔗糖梯度离心以分析如前所述[6]的肺部聚集体。简而言之，肺组织在重生缓冲液中均化[50mM HEPES，pH 7.4;75毫米KCL;5毫米₂Cl₂；250毫米蔗糖;100µg / ml cyclohexamide;德勤约2毫米;特里同x - 100 1%;1.3%脱氧胆酸盐;10µl/ml Super-asin (Ambion, Austin, TX)]，离心清除，上清液分层至20-47%线性蔗糖梯度上。梯度在90000 x g下在4°C的超离心机中分离4小时。然后使用氟inet分馏器将每个梯度向上移位，并将254 nm的光密度记录在记录仪上。

统计分析

除雷帕霉素试验是单次试验使用两窝鼠外，暴露量至少为每气氛2升。正态分布数据的分析使用t检验或方差分析(ANOVA，一或双向)与Tukey检验，以确定个体差异时适当。非正态分布数据采用Mann-Whitney或Kruskal-Wallis秩方差分析，适当时采用Dunn方法进行多重比较检验。为简便起见，图中数据不论采用何种检验方法均以均值±SEM列出，显著性水平设为p<0.05。

结果

禁食可抑制RA和Oxexposed大鼠幼鼠肺部mTOR活性

为了描述高氧对eIF4F组装的影响，我们使用了母亲分离和新生儿禁食后再喂食的方法，目的是在高氧存在时先抑制，然后刺激mTOR活性和eIF4F组装。利用S6K1磷酸化作为mTOR激活的标志，初步研究表明，需要禁食8小时才能减少S6K1在Thr上的磷酸化³⁸⁹(没有显示)。即使这段禁食,并非完全抑制mTOR活动,作为雷帕霉素腹腔内注射进一步抑制S6K1和4 e - bp1磷酸化水平低于禁食8小时快,期间(图1)。血清葡萄糖水平保持不变是否独立的幼崽被饲养在RA或牛(类风湿性关节炎:未禁食:92±5;禁食105±15;牛:不禁食126±23;空腹95±6 mg/dl, NS)。与我们之前的研究结果一致，大鼠幼鼠暴露于95% O的环境中24小时₂RA:时间0-11.2±0.3 g, 24小时-13.2±0.4 g;牛:时间0-11.3±0.2 g, 24小时-13.1±0.2 g, NS)[6]。无论是类风湿关节炎动物还是牛类动物，体重在禁食8小时期间没有改变。

图1:禁食未能完全抑制肺部MTOR活动。大鼠幼犬收到I.P.在暴露于室内空气或95％O之前注射雷帕霉素（4mg / kg）或等效体积的DMSO₂24小时。24 H后，母系分离禁食8 H，灌胃无菌H₂氧，30分钟后收集肺。图中显示了下游mTOR底物S6K1和4E-BP1磷酸化的代表性免疫印迹(n=3只小狗/情况)

如图2所示，禁食8小时(dam - feeding vs. water - feeding)降低了Thr上S6K1的磷酸化水平³⁸⁹但对Thr位点4E-BP1磷酸化无影响⁷⁰．禁食也减少了S6K1衬底的磷酸化,S6Rp,虽然只在RA动物(图2)。配方喂养,然而,未能刺激S6K1, S6Rp,或4 e - bp1磷酸化后禁食水平以上30或60分钟(图2)。这些研究表明,禁食能够抑制mTOR肺的活动,配方奶喂养引起的肺刺激是相当不敏感的。

图2:喂养不能刺激RA和ox暴露的大鼠幼鼠的mTOR活性。A)免疫印迹法代表了S6K1, S6Rp和4E-BP1的磷酸化。直方图(B-D)显示室内空气(黑色)和95% O的肺中平均磷酸化水平₂暴露(灰色)幼崽。柱代表平均值(n=11-12)，柱代表SEM。“*”表示与母鼠相比有显著差异(p<0.05)。

蛋白质合成速率通常与活性eIF4F复合物的形成直接相关。eIF4G与eIF4E的结合(eIF4G:eIF4E)代表了活性eIF4F复合物组装的替代品。从肺匀浆中亲和纯化eIF4E，可以鉴定eIF4E与eIF4G和4E-BP1的相对关联。使用这项技术，我们发现禁食和再喂食显著改变了RA和牛的eIF4G:eIF4E (p<0.05)(图3)。在RA暴露的幼犬中，eIF4G:eIF4E在喂食60分钟后翻了一倍(水喂养:0.91±0.22)vs．60 min-fed: 1.88±0.2,p<0.05-t检验)。相比之下，在牛中，最大的eIF4G:eIF4E发生在喂食后30分钟(水喂养:1.00±0.20)vs．30 min-fed: 1.99±0.21,NS - Mann-Whitney)。eIF4E的可用性由4e - bp的释放调控，4e - bp的磷酸化依赖mtor。评估4E-BP1的相关性:eIF4E在相同的样本中显示，在RA和ox暴露的动物(RA: damated, 1.0±0.0)中，禁食增加了4E-BP1的结合vs．水喂养，2.6±0.5;牛:坝饲1.2±0.1，水饲3.2±0.6,p <0.001)。然而，喂养和高氧均未改变4E-BP1:eIF4E。

图3:高氧并不抑制饮食刺激的eIF4F组装。亲和纯化的肺提取物通过电泳分离，免疫印迹法鉴定eIF4G与eIF4E共沉淀的相对量。A)有代表性的免疫印迹描述了每一组中的一只动物。分隔线代表不相邻的车道。B)直方图显示eIF4G与eIF4E的相对关联。柱(黑室空气;灰色- 95% O₂）表示手段（n = 11-12）和条形图。分析发现在Ra PUPS（ANOVA，P = 0.038）中喂养EIF4G：EIF4E在Ra PUP中的结合的积极效果，在60分钟的水和式喂养幼崽之间鉴定出差异（P <0.05）。对于牛幼崽，测试显示饲养的效果（Kruskal-Wallis，P = 0.041），但没有个体差异。

肺对膳食喂养的相对不敏感引起了人们的担忧，即以牛奶为基础的配方奶粉可能不会刺激新生大鼠的翻译调节途径。作为对照，我们研究了膳食刺激的eIF4F在骨骼肌和肝脏中的组装。图4显示，8小时快速喂养后的配方喂养可显著刺激肝脏中eIF4F复合物的活性组装，但对腓肠肌的作用不大。这一系列实验的综合结果表明，牛奶喂养可以以一种组织特异性的方式增加翻译活性，高氧不会减弱肺中的这种反应。

图4:饲喂可诱导eIF4F在肝脏内组装。电泳分离亲和纯化的肝脏和腓肠肌提取物，测定eIF4G与eIF4E共沉淀的量。A组显示了来自单个动物的每个组织的具有代表性的免疫印迹。B)柱状图显示eIF4G与eIF4E的相对结合。柱代表平均值±扫描电镜(n=3)和柱状扫描电镜。统计分析显示，饲喂eIF4G 60 min后:30 min时，相对于水饲或粉饲幼犬，eIF4E结合量增加(p<0.05, t检验)。

图5:超氧质抑制了与喂养的无关的聚瘤聚集。如在方法所述，对暴露于Ra或低氧的幼崽的总肺RNA进行蔗糖密度梯度离心。a）追踪代表通过OD 254nm测量的特异性蔗糖密度的RNA的量。虚线分离非多种多元（NP）和多血糖（P）RNA。b）Ra（黑色）和氧（灰色）动物的P / NP的平均比例由柱表示（每个喂食条件/气氛）。棒代表SEM。双向Anova揭示了牛对多肌聚集的显着影响（P = 0.012），但在RA或牛动物中没有喂养效果

无论喂食与否，高氧都抑制多聚体聚集

多体RNA与非多体RNA比值的增加表明起始事件的相对增强。图5显示，两组的多聚体聚集对配方喂养均无响应，这与S6K1和4E-BP1磷酸化缺乏变化相一致。然而，在水和配方喂养下，高氧降低了多体RNA和非多体RNA的比例(2- way ANOVA, p<0.05)。对这一发现的解释表明，非eif4f事件在起始水平抑制mRNA翻译。

高氧诱导eIF2α持续磷酸化

与我们之前的观察相似，我们发现高氧倾向于增加丝氨酸上的eIF2α磷酸化⁵¹在连续喂食期间（RA：1.0±0.1vs．牛：3.5±1.0，p = 0.08，图6）[6]。与水相比，配方喂养既不增加也不会降低任何大气中的磷酸化。在配方喂养动物中，EIF2α的磷酸化在恶化的幼虫中喂食后60分钟（RA：1.2±0.3vs．牛：2.9±1.0，P <0.05，图6）。另一方面，eif2bε的分析未能识别在SER上喂养EIF2Bε表达或磷酸化的效果^535.(双向方差分析)。

图6:95% O的效果₂a)免疫印迹法表示eIF2α和eIF2Bε的相对磷酸化。B)直方图显示eIF2α在RA(黑色)和Ox(灰色)幼犬中的平均磷酸化水平。柱代表平均值(n=12)和柱代表SEM。在受损动物中，Ox的eIF2α磷酸化水平高于RA幼犬(p=0.08)。在两种环境中饲养的动物中，配方喂养均不能改变eIF2α的磷酸化。“†”表示RA与OX在60 min时存在显著差异(p<0.05)。

讨论

积极的营养支持有发展BPD风险的早产儿是新生儿重症监护的标准做法。尽管做出了这些努力，营养不足仍然存在于这一人群中，与胎龄匹配对照[16]相比，这一人群的生长失败发生率较高。动物研究为营养不良的全球影响提供了令人信服的证据，包括肺重量、肺泡数量、弹性蛋白和羟脯氨酸含量的减少，以及II型细胞的成熟[17-19]。早产儿的生长失败进一步被导致BPD发展的危险因素所混淆[20,21]。在新生豚鼠中，限制营养摄入可增强高氧毒性，导致死亡率增加，但不改变肺部炎症或抗氧化能力[22]。高氧是否会改变肺中调节mRNA翻译的营养信号，以及这种变化是否会影响肺生长，目前尚不清楚。接触to95% O₂在持续护理期，新生儿[6]降低肺蛋白合成，暂时性增强mTOR活性。目前的研究在这些早期发现的基础上进行了扩展，说明高氧不会改变喂养诱导的起始复合物组装或调节翻译起始的主要信号事件，并重申高氧诱导的多聚体聚集减少与eIF2α磷酸化相关。

在肺内，初乳、成熟猪乳和酪蛋白配方均可提高空腹后的FSR，而只有初乳可提高蛋白质合成能力(RNA/蛋白质比)[13]。肺喂养的刺激效应是对血清氨基酸水平的变化作出反应，而不是胰岛素水平，这表明营养蛋白是[23]生长的主要贡献者。基于研究膳食刺激对新生猪骨骼肌的影响的方法，本研究检测了高氧对饲喂[14]后30和60分钟营养信号的影响。尽管8小时的快速反应足以减少S6K1和S6Rp磷酸化，并增加4E-BP1:eIF4E的关联，但在RA或Ox暴露的动物中，它并没有产生预期的4E-BP1磷酸化或eIF4G:eIF4E组装的减少。对禁食的不同反应可以用Thr的不敏感性来解释⁷⁰相对于其他磷酸化位点或禁食抵抗eIF4F因子的存在。胎儿和成人eIF4G1的分子量和eIF4A1/2表达的差异被认为可以解释胎儿肝雷帕霉素耐药，这种影响与mTOR底物磷酸化[24]无关。虽然目前的研究不是为了检测这种变化，但其结果完全符合即使在高氧存在下也能促进eIF4F组装的发育范式。

在新生仔猪的骨骼肌和肝脏中，通过饲养激活翻译信号成分已被广泛研究。在骨骼肌中，膳食蛋白刺激Akt、S6K1和4E-BP1磷酸化，并激活eIF4F复合物[25]组装。与此形成鲜明对比的是，在本研究中，完全膳食喂养并没有增强S6K1、S6Rp或4E-BP1的磷酸化，但仍然刺激了RA和Ox处理过的幼犬eIF4G:eIF4E复合物的形成。eIF4G在丝氨酸上的磷酸化¹¹⁰⁸在一些研究中，包括对骨骼肌[26]中饲料诱导蛋白合成的研究，都与活性eIF4G:eIF4E组装直接相关。rapamycin非依赖性eIF4G磷酸化与喂食后PKCε激活有关，这提高了mtor非依赖性eIF4F形成可能也参与肺[26]的可能性。

eIF2α的磷酸化使eIF2-GDP与eIF2B的亲和力增加了150倍，这表明相对轻微的磷酸化增加显著抑制帽依赖的mRNA翻译[27]。在RA暴露的新生大鼠中，禁食和再喂养逐渐增强eIF2α磷酸化，但并不显著，直到30分钟后磷酸化水平下降至damfeed状态。这种eIF2α磷酸化的时间模式与GCN2 (General Control non - deepresible2)的激活是一致的，GCN2是eIF2α激酶对氨基酸剥夺[28]的响应。虽然eIF2α的磷酸化倾向于在高氧时更大，但这种作用直到餐后60分钟才达到统计学意义。在Ox组中，eIF2α磷酸化与多聚体聚集比eIF4F组装更接近，这表明eIF2α单独或与其他信号事件一起调控起始，抑制饲养刺激的起始事件。RA幼犬中多聚体聚集和eIF4F装配之间缺乏关联可能反映了禁食期间起始和延伸率的相同变化，从而导致较高的多聚体:非多聚体RNA (P/NP)比率。

尽管在此提出的研究结果表明，高氧对mTOR信号通路调节启动的影响很小，但仍有一些担忧。使用基于人乳清/酪蛋白的配方可能不足以刺激mTOR信号。成熟的大鼠奶或基于大鼠而不是人奶组成的酪蛋白配方可能产生不同的结果。理想情况下，评估喂养诱导的翻译效应还应包括测量蛋白质合成率。这种方法被有意识地省略，以避免在餐后立即引入额外的压力源，并避免长时间的高氧消除。即使没有这些可能有用的数据，所选择的方法也能够刺激eIF4F组装，并识别RA和牛动物之间的差异。

总之，这项研究的结果表明，高氧可能通过应激诱导的eIF2α磷酸化机制，降低了喂养全面刺激肺翻译启动的能力。考虑到哺乳动物在出生后即刻的全身蛋白质合成率高于生命的任何后续阶段，短暂的多体聚集减少有可能改变对关键发育窗口[29]必不可少的生长因子的表达。出生后的快速肺泡化使肺特别容易受到高氧对蛋白质合成的负面影响，并有可能对终身肺功能产生负面影响

财政支持表

这项工作的部分资金来自宾夕法尼亚州立儿童医院的儿童奇迹网络。

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条信息

文章类型:研究文章

引用:Konsavage WM, Edwards B, Shenberger JS(2016)喂养诱导的翻译起始复合物组装在高氧暴露的新生大鼠肺部的维持。儿科新生儿护士开放获取2(3):doi http://dx.doi。org/10.16966/2470 - 0983.114

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出版的历史:

收到的日期：2016年5月27日

接受日期:06年6月2016年

发表日期:2016年6月10