摘要

从埃及Al-Menofia省不同地方采集120只当地新鲜和进口冷冻肉鸡的胸、肝、肾和胗，采用高效液相色谱法测定土霉素(土霉素)和氨苄西林残留的含量。

结果显示,55%,70%,50%,70%,10%和15%检查样品的当地肉鸡肉、肝、胃、肾,进口烤肉肉和肾脏是积极的残留的场外平均值为471.4±33.8、773.9±49.5、11.6±0.9、2676.0±117.5、114.7±8.3、546.7±41.2,分别。50%、55%、35%、50%、35%和45%的相同样品中氨苄青霉素残留量呈阳性，平均值分别为329.2±20.7、853.3±65.1、164.5±9.8、531.6±37.4、177.9±15.4和323.8±26.6。

各种烹饪方法的应用;煮、炸和烤十烹饪鸡肌肉样品表明,在降低场外残留的浓度产生影响的意思是减少% 84.52%,93.62%和96.58%沸腾后,煎炸,烧烤和81.22%,90.54%和94.5%沸腾后,油炸和烧烤的氨苄青霉素残留浓度。

鸡尸体中存在的抗生素残留物对消费者的健康构成风险，如抗生素耐药性、致畸性、致癌性、肝肾衰竭等。兽医控制家禽养殖场撤出时间和屠宰后检验抗生素残留是减少禽肉中抗生素残留发生率、改善鸡肉质量和保障消费者安全的重要措施。

介绍

在家禽中，抗生素被过度用于各种目的，如预防、控制疾病和作为生长刺激物，因此抗生素的使用促进了抗生素的高效生产，并提高了家禽的健康和福祉[1,2]。土霉素(OTC)和氨苄西林是兽医中预防和控制家禽[3]疾病最常用的常规用药。

不幸的是,在食用动物抗生素的使用可能会残留在动物源性食品如肉由于未能观察每种药物的戒断期,头孢菌素的剂量的动物,动物饲料的污染与对待动物的排泄物和/或未经授权的非法使用抗生素[4]。食用动物组织中存在土霉素残留对消费者的健康有有害影响，如过敏反应、耐药微生物的传播、肝脏损伤、牙齿发黄、胃肠道紊乱以及可能的诱变和/或致癌影响[5]。而在肉类中食用残留青霉素引起的最常见的不良反应是过敏反应，特别是皮疹和胃肠道紊乱，包括腹泻、恶心和有时呕吐。禽肉中抗生素残留的监测是控制食品质量和安全的重要手段，因此，目前有几种分析方法对禽肉中抗生素残留进行检测，其中高效液相色谱法(HPLC)[7]是最有效、最灵敏的检测方法。采用高效液相色谱技术[8]可以相对简单、快速地对组织样品中存在的多种残留进行典型检测。

为确保人类食品安全，世卫组织和粮农组织制定了食品中最大残留限量(MRLs)标准。此外，欧盟(EU)也设立了自己的MRLs[9]。根据粮农组织/世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会[10-12]，非处方西林残留的可接受MRLs在肌肉中为200ug/kg，在肝脏中为600ug/kg，在肾脏中为1200 ug/kg，而在肌肉、肝脏和肾脏中为50ug/kg。通过敏感性试验后给禽鸟使用抗生素，确定准确的剂量，并在停药时间防止屠宰，可实现禽肉抗生素残留的控制。此外，良好的烹饪和冷冻是用来去除大部分抗生素残留;在工业加工中使用的高热和骤冷也可以去除残留[14]。

本研究的目的是通过高效液相色谱(HPLC)技术监测土霉素和氨苄西林等抗生素残留，从而揭示国产和进口冻肉仔鸡组织和内脏的安全性。特别提到了最常见的烹饪方法(煮、煎、烤)对抗生素残留水平的影响。

材料和方法

收集的样本

从埃及Al-Menoufia省不同地方的家禽商店采集120只肉鸡的胸、肝、肾和胗作为本地和进口的冷冻样品，用于土霉素和氨苄西林残留的测定。样品在干净的无菌聚乙烯袋中收集，并立即通过冰盒直接送到实验室。

检验样品中抗生素残留的测定

采用高效液相色谱法测定样品中土霉素和氨苄西林的残留量。

土霉素残留量的测定

所有标本均剪去外部脂肪及筋膜后切成细粒。每个待分析器官取2克，用数字秤称重，切成非常小的块，然后用Sartorius绞肉机磨成细粉，在搅拌机中匀浆2分钟，加入0.1克柠檬酸。在该混合物中分别加入1 ml硝酸(30%)、4 ml甲醇和1 ml去离子水。将含有固体颗粒的悬浮液放入涡流中搅拌均匀，超声浴15分钟，5300 rpm离心10分钟。通过0.45 um尼龙过滤器过滤后，根据Senyuva et al.[15]的方法将20 ul的溶液注射到高效液相色谱中进行分析。

氨苄西林残留的测定

每个样品用特定的溶剂提取药物

提取:准确地将每个样品放入50 ml加盖的聚丙烯离心管中5±0.01 g，并加入15 ml乙腈/水(15:2)。样品完全均质1分钟，4000rpm离心。取上清液重复匀浆和离心1次。将混合上清液放入圆底烧瓶中，在37℃下蒸发乙腈。在烧瓶中应至少找到大约6毫升剩余上清液。使用磷酸盐缓冲液(pH 8.5)，上清液的总体积应达到20 ml。上清通过再生纤维素，25 mm, 45 um注射器过滤器(安捷伦针5185-5831)过滤。实际上，将10 ml提取液装入安捷伦Sampli Q OPT 6 ml /150 mg cartridge[16]上。

净化:用0.1%甲酸水洗墨盒，然后用pH为8.5的磷酸钾缓冲液冲洗。最后用3ml乙腈洗脱样品。用13mm, 45ml聚四氟乙烯(PTFE)注射器过滤器(安捷伦引脚518-5836)过滤样品。洗脱液在氮气下室温干燥。残留在流动相中重新悬浮至1.0 ml。样品旋转2分钟，然后转移到一个2ml的自动进样器小瓶(Agilent pin 5182-0864)[17]。

固相萃取及最终样品制备:SPE滤芯被放入真空歧管系统，SPE滤芯流出液进入溶剂收集器。准确地说，先加入25 ml甲醇，再加入25 ml水，再加入40 ml 0.01 M的氢氧化钙。流量对于这些步骤并不重要。将3ml样品以不超过2滴/s的流速加到药盒中。在此步骤不允许墨盒干燥，用40ml蒸馏水和10ml乙腈冲洗墨盒。用40 ml 2.5%乙酸(含50%甲醇)连续洗脱。收集的洗脱液用旋转蒸发器在45°C下蒸发至完全干燥。干燥后的残渣在3ml的流动相中重新合成。样品混合后经0.2µm滤器过滤后注入LC体系。

色谱条件

氧四环素:流动相为0.1%的甲醇和甲酸，采用梯度法，流速为1.5 ml/min。在25°C。采用Hypersil gold C18 (10 um, 100 × 4.6 mm)色谱柱进行分离，流动相如上所述。采用波长为350 nm的PDA检测器进行检测。通过软件(Chromo Quest 5)自动外推曲线下面积，获得并计算样品中残留的定量。

氨苄青霉素:用于抗生素检测的高效液相色谱(HPLC)是德国瓦尔德波隆安捷伦科技(Agilen Technologies, Waldbronn, Dokki)动物健康研究所安捷伦1100高效液相色谱系统，配备g1311a型四元泵、254nm波长紫外检测器(g1314a型)、自动进样器(型号G1329A副ods)和Shim包(150 × 4.6 mm)柱(岛津，京都，日本)。

结果与讨论

从报告的结果表(表1)和数字(图1和2)很明显,氧四环素残留被发现在55%,70%,50%,70%,10%和15%当地肉鸡肉,检查样品的肝、胃、肾,进口肉用鸡肉和肾脏平均值为471.4±33.8,773.9±49.5,11.6±0.9,分别为2676.0±117.5、114.7±8.3和546.7±41.2。目前的结果与Salehzadeh et al.[18]报道的结果一致，后者检测到鸡肝脏和肾脏中土霉素(OTC)的平均浓度分别为576.657±201.908和517.56±186.64 ug/kg。获得的结果高于Cetinkaya等人[19]获得的结果，后者测定了鸡组织中土霉素残留量为17.2 ug/kg。目前的结果低于Salama et al.[20]的记录，后者报告了新鲜鸡胸肉、大腿和肝脏样品中土霉素残留量的最高浓度分别为5812、6010和8148 μg/ kg。

表1:本地及进口冻肉仔鸡及鸡杂样品土霉素、氨苄西林残留量统计分析结果(Ug/Kg) (n=20)
*东南部-标准差均数++-t检验显示差异极显著(P<0.01)

图1:本地及进口冻肉仔鸡及鸡杂样品土霉素浓度平均值(ug/kg)

图2:本地及进口鸡肉及鸡杂样本中氨苄西林浓度平均值(ug/kg)。

图3:根据土霉素残留量对本地及进口冻肉仔鸡肉品样品的可接受性进行分析。
(*MRL根据美国联邦法规，2003年，FAO/WHO, EOSQC, 2008年和食品法典委员会，2012年，**MRL根据EC, 2010年)

否则,氨苄青霉素残留检测到50%,55%,35%,50%,35%和45%的地方烤焙用具的检查样品肉、肝、胃、肾,进口烤肉肉和肾脏平均值为329.2±20.7,853.3±65.1,164.5±9.8,531.6±37.4,177.9±15.4,323.8±26.6,分别。氨苄青霉素残留在样品检查证实的发病率已经被Verdon记录等。[21]利用高效液相色谱法测定氨苄青霉素残留在肾脏,肝脏和肌肉组织和检测极限大约是3-11 ug / kg和定量的限制是评估25 ug / kg。

根据土霉素残留量检测的本地和进口肉鸡肉和鸡胚样品的可接受性见图3。准确率分别为65%、50%、50%和100%。所有进口肉类和肾脏的检验样本均被接受，只要它们不超过允许的限度。根据氧四环素的推广(200 ug /公斤肌肉,600 ug / kg肫肝和肾1200 ug / kg),美国联邦法规规定[22],粮农组织/世卫组织[23],埃及组织标准化和质量控制的3692号“EOSQC”[10]和食品法典委员会[12]。否则,根据氧四环素残留的推广(100 ug / kg肌肉,300 ug / kg肝脏和胃和肾600 ug / kg)估计的粮农组织/世卫组织(1998)[24]和欧洲共同体(欧共体)[25],公认的当地肉用鸡样本肉类、肝脏、肾脏和胃基于氧四环素残留水平分别为45%,45%,40%和100%。进口肉鸡肉和肾脏的土霉素残留量分别为90%和95%，如图3所示。AlGhamdi et al.[26]在鸡组织样品中检测到土霉素(土霉素)残留量不同，他们分别检测到87%和100%的家禽肌肉和肝脏样品中有土霉素残留量。

根据氨苄西林残留水平检测的本地肉鸡肉和鸡胚样品的可接受性如图4所示。准确率分别为50%、45%、70%、50%、70%和55%的本地肉鸡肉、肝脏、砂囊、肾脏、进口肉鸡肉和肾脏的检测样品被接受。本研究依据FAO/WHO(1998)[24]、埃及标准化与质量控制组织“EOSQC”No. 3692(2008)[10]、欧洲共同体(EC)(2010)[25]和食品法典委员会(2012)[12]记录的氨苄青霉素最大残留限量(肌、肝、胃、肾各50 ug/kg)。此外，Darwish等人的[27]在18%时可以在组织样品中检测到不同比例的氨苄西林残留。

结果表明，肉鸡肝脏中土霉素和氨苄西林残留量最高。这些结果与Pavlov et al.[28]的报道一致，Pavlov et al.[28]的报道中提到，在肝脏和肾脏中残渣浓度最高，而在皮肤脂肪、腹部脂肪和肌肉中残渣浓度很低。

土霉素和氨苄西林残留量与国产和进口肉鸡肉粒检验样品差异极显著(P<0.01)，见表2。

图5所示的结果表明，不同烹饪方法(煮沸、油炸和烧烤)对检测的鸡肉样品中土霉素和氨苄西林残留的影响。鸡肉中OTC残留量在煮、煎、烤前的平均值为446.16 ug/kg。而经过煮沸、油炸和烧烤后，OTC残留量的降幅平均值分别为84.52%、93.62%和96.58%。

鸡肉中氨苄青霉素残留量在煮、煎、烤前的平均值为253.7 ug/kg。煎炸和烧烤后氨苄西林残留浓度的降幅平均值分别为81.22%、90.54%和94.5%。结果表明，蒸煮、油炸和烧烤等烹饪方法对土霉素和氨苄西林残留的全部或部分降解均有积极作用。因此，采用煮沸、焙烧、油炸和高压灭菌等热处理方法，可能会使所有药物残留[29]全部销毁。因此，使用温度更高、时间更长的适当烹饪工艺可以最大程度地减少食品中的抗生素残留，并为消费者提供额外的安全边际。因此，通过良好的烹煮可以去除大量的抗生素残留，如土霉素和氨苄西林[14]。

结论和建议

结果可以得出结论,当地和冷冻的样品检查进口肉鸡杂碎和组织被证明含有残留的氧四环素和氨苄青霉素尤其是肝脏样本其次是肾脏、肌肉和胃,从而可能构成健康危害动物和人类。此外，不同的烹饪方法(煮沸、油炸和烧烤)的应用对土霉素和氨苄西林的残留有积极的影响，以降解这些检测样品中的残留浓度。

因此，为了改善禽肉的卫生质量，并保障消费者免受禽肉中抗生素残留的不利影响，应在屠宰场进行宰前检验，以排除病禽，并应使用简单的应建立食品中药物残留的主动监测程序，并对肉类进行热处理，使饲料中的抗生素污染物失活。

图4:根据本地及进口冻肉仔鸡的氨苄西林残留含量，检验样本的可接受性。
(* MRL根据美国联邦法规，2003年，FAO/WHO, EOSQC, 2008年，EC, 2010年和食品法典委员会，2012年)

表2:土霉素和氨苄西林在当地肉鸡肉品和内脏样品中的残留量的方差分析。
++-t检验表明差异极显著(P<0.01)

图5:不同烹饪方法(水煮、油炸和烧烤)对鸡肉中土霉素和氨苄西林残留量的影响(减少%)

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条信息

文章类型:研究文章

引用:Elbagory AM, Yasin NA, Algazar EA(2016)不同烹饪方法对埃及进口和本地冷冻肉鸡及其内脏中部分抗菌残留的影响。营养食品技术2(3):doi http://dx.doi。org/10.16966/2470 - 6086.127

版权:©2016 Elbagory AM等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版的历史:

收到日期:2016年4月20日

接受日期:2016年6月3日

发表日期:08年6月2016年