摘要

家禽肉经常被污染弯曲杆菌菌株，并被认为是导致人类的微生物的主要来源弯曲杆菌肠胃炎．这项研究是为了检测弯曲杆菌spp．孟加拉国达卡市不同地区的超市里出售的生冷冻鸡肉、鸡内脏、预煮的冷冻鸡块和鸡肉香肠。弯曲杆菌的分离采用常规方法，除鸡肠外，每个样品均用90ml富集肉汤均匀化10g，在42℃微嗜气条件下培养48h。将样品在添加CCDA选择性补充的弯曲杆菌炭差示琼脂上划线，在42℃微嗜气条件下培养48h。对于鸡肠道，从肠道内壁取棉签，直接在CCDA板上划线。镜检、革兰氏染色、生化检查对其进行推测鉴定弯曲杆菌spp．结果表明弯曲杆菌spp．在生鸡肉、鸡肉香肠和鸡内脏的不同部位都能找到，而鸡块则显示出弯曲杆菌spp．这一发现反映了在我们厨房准备食物时处理家禽的交叉污染风险。

关键字

食品安全;食品卫生;弯曲杆菌病;家禽;家禽产品

介绍

人类肠炎在发达国家和发展中国家大多是由弯曲杆菌spp．与c .空肠，属于耐热组的最重要的致病菌株，被认为是全世界食源性和水性胃肠炎的主要原因[1]。空肠弯曲杆菌通常被认为是弯曲菌病的病原体，通常是从鸡和牛中分离出来的，鸡被认为是主要的感染源之一。

家禽肉类和家禽产品在全球范围内的消费和生产呈现上升趋势，原因有很多，包括其在食品制备中的使用增加、消费者强烈的偏好以及对成本合理的丰富蛋白质来源(20-23%)的巨大需求[2-4]。

弯曲杆菌作为一种共生微生物出现在家禽胃肠道的微生物区系中，因此它很可能发生在家禽的外部以及生长环境的污染。家禽的正常体温促进了该微生物在胃肠道的建立，从而支持其较高的最适生长温度[5]。据报道弯曲杆菌人类感染通常与摄入处理不当或未煮熟的食物有关，主要是禽类产品[6]。

作为弯曲杆菌发生在家禽胃肠道的天然菌群中，屠宰后有可能传播到家禽的胴体、部分和产品。此外,c .空肠在改良的空气和真空包装中也能很好地保存，在冷藏温度下也能很好地保存，这使得在经过不良处理和加工的包装鸡肉产品中也有可能发生这种情况。的患病率弯曲杆菌spp．对生家禽产品的摄入量从0至100%不等，平均为62%。

这项研究的目的是评估弯曲杆菌。在冷冻条件下保存的生鸡肉(冷藏)、鸡内脏和包装鸡肉产品。

材料和方法

样品收集

在屠宰时:从厨房取出一根鸡肠子，放在无菌塑料袋里，并尽快送到实验室。

在超级市场:他们从超级市场购买三包完整的冷冻预制鸡块和鸡香肠，并把它们送到化验所。购买生的冷冻碎鸡肉，并装在胶袋内，原封不动地送交实验室。3.

媒体的准备

弯曲杆菌浓缩汤:25克在1升水中充分混合。它在121°C下旋转和蒸压15分钟(在螺旋盖瓶中)。

浓缩和分离程序

对于鸡块，鸡肉香肠和碎鸡肉:称量的10克样品用90毫升弯曲杆菌富集肉汤均质，42℃微嗜气条件下孵育24小时。在CCDA(弯曲杆菌炭差示琼脂)上划线后，这是弯曲杆菌的选择性，并在42°C的微嗜气条件下培养48小时。盘子被观察到。对于鸡肠道，从结肠内壁取棉签，直接在CCDA板上划线。

试剂使用

所用试剂列于附录I和II。

观察和结果

孵育48小时后观察到培养皿(图1)。

图1:弯曲杆菌在CCDA车牌上有菌落

殖民地的特点弯曲杆菌。在CCDA板

对于鸡肉香肠和生的冷冻肉糜，生长较重或中等。蜂群呈灰色，闪闪发光，呈圆形，高度升高，质地呈乳脂状。对于鸡块样品，没有发现生长。

形态学和运动性的显微镜检查

疑似菌落的材料悬浮在盐水中，并通过光学显微镜进行特征评估。螺旋状或弯曲的细长杆具有开瓶器一样的运动，虽然不是很清楚。较老的培养显示球粒形态活动较少。

革兰氏染色法

对疑似菌落进行革兰氏染色。均为革兰氏阴性。

氧化酶试验

氧化酶试剂(四甲基对苯二胺盐酸盐)取于滤纸上，置于皮氏培养皿中。滤纸被蒸馏水浸湿了。用牙签从CCDA琼脂上取下菌落，浸泡在氧化酶溶液区。如果在10秒内出现蓝色，则表示阳性结果。

过氧化氢酶试验

从CCDA平板上取少量生长的菌落(单个、离散的菌落)放在干净的显微镜载玻片上。几滴H₂O₂加入到涂片中它和牙签混在一起。O₂这可以从冒泡中得到证明。

Hippurate水解试验

本试验用于确定微生物是否能通过马尿酸水解酶的作用将马尿酸钠水解成苯甲酸和甘氨酸。重接种(单菌落)海马酸钠溶液0.4 ml。它被漩涡摇动。37°C有氧培养2小时。往侧边缓慢加入0.2 ml茚三酮溶液，形成覆盖层。它是不可动摇的。试管在37°C再次孵育，10至20分钟后检查颜色变化。

深蓝色或紫色表示阳性反应。无色的试管在海马酸水解试验中呈阴性(表1)。

样本	增长42°C	氧化酶试验	过氧化氢酶试验	Hippurate水解试验
鸡块
示例1	-	-	-	-
示例2	-	-	-	-
示例3	-	-	-	-
鸡肉香肠
示例1	+	+	+	+
示例2	+	+	+	+
示例3	+	+	+	+
生的冷冻鸡肉碎	+	+	+	-
鸡肠	+	+	+	+

表1:CCDA平板上菌落的生化检测结果

讨论

在这项研究中,弯曲杆菌spp．是从家禽和家禽产品中分离出来的。在分离之前对鸡块样品、鸡肉香肠样品和冷冻生肉糜样品进行了富集，因为微生物可能由于冷藏而处于应激状态。对于鸡肠道，从肠道内壁取棉签(因为它们是微嗜气的，棉签棒被推到里面)，直接在选择的培养基上划线。结果表明，鸡肉香肠、冷冻生肉末和鸡肠中含有弯曲杆菌spp．弯曲杆菌鸡块样品中没有。所有的培养都是在42°C进行的，因为大多数病原体无法在这个温度下生长，因此这里的污染风险很低。

的存在弯曲杆菌spp．在预先煮熟的冷冻家禽产品(鸡肉香肠)中显示处理不当。因为弯曲杆菌在改良的空气、真空包装和冷藏温度下也能很好地存活，有可能发生在经过糟糕的处理和加工的包装鸡肉产品中。食用煮得不充分的冷冻家禽产品可能是获得食源性感染的原因。鸡内脏让屠宰场受到控制弯曲杆菌这意味着在我们的厨房处理家禽时存在交叉污染的风险。由于鸡的肠道，尤其是盲肠和结肠可容纳大量的大肠弯曲杆菌作为共生菌群，在加工过程中，肠道可能渗漏或破裂，内容物转移到胴体皮肤。因此它很可能被发现弯曲杆菌如果发生污染，肉类(家禽胴体)中的spp。然而，超市提供了生鸡肉的储存和冷藏或冷冻条件下的陈列设施。这证明，正在采取措施控制在这些场所出售的生鸡肉的质量和安全。但通常情况下，如果鸡的某个部位受到了污染，病菌也有可能传播到其他部位。因此，即使是鸡肉的内部部分也受到污染也不足为奇，很可能是由于加工过程中的交叉污染。

冰鲜肉样本取自各大超市，这些超市的鸡肉都是在冷藏条件下存放和陈列的。超市提供的鸡肉通常是在比菜市场更卫生的条件下提供的，而且储存温度也有更好的控制。虽然超市里的食品看起来更卫生，但包装前的准备工作可能不卫生，包装设施本身也可能处于较差的条件下。

鸡块显示出缺乏弯曲杆菌无法分离出微生物可能是由于产品中含有高浓度的盐和其他成分，或者鸡块经过了适当的处理过程。弯曲杆菌通常能在2.0%的盐中存活。在这种情况下，样本可能被污染了c .空肠但后来人们用盐和香料杀死了它。另一个原因可能是它们在冷冻前经历了很少的烹饪过程。这可能降低了发生的风险弯曲杆菌．

镜检和生化检查推定为弯曲杆菌采用海蒲酸水解试验进行鉴别c .空肠和其他物种。除生鲜冰鲜肉外，其余样品均呈海马酸水解阳性，因此可以推断c .空肠可能存在于香肠和鸡内脏中。其他物种，如C. coli, C. lari, C. fetal, C. upsaliensis可能存在于生鲜冷冻肉中，因为它们不能水解河马酸。同样，我们应该记住弯曲杆菌当物种鉴定是基于一个单一的表型特征时，如海马类的水解，有时可能会被错误分类。应进行分子分析，以确定物种水平的鉴定。在一项研究中，有报道称c .空肠在新鲜和冷冻生鸡肉的不同部位发现了c .空肠对腌制生鸡肉和冷冻鸡肉制品[7]进行了分析。

结论

食用煮得不充分的冷冻家禽产品有可能感染由弯曲杆菌超市比菜市场提供更健康的环境来储存冷冻生鸡肉，但包装本身可能是污染源。在厨房内处理家禽不当可能导致厨房内的交叉污染Campylobcater作为家禽胃肠道的正常微生物群存在。

参考文献

1. Reid AN, Pandey R, Palyada K, Naikare H, Stintzi A (2008)空肠弯曲杆菌参与响应酸性pH和胃运输的基因。应用环境微生物74:1583-1598。［Ref。］
2. Sampers I, Habib I, Berkvens D, Dumoulin A, De Zutter L, et al.(2008)加工实践有助于弯曲杆菌比利时鸡肉制品污染。Int J Food Microbiol 128: 297-303。［Ref。］
3. vandeas S, Marcq C, Dubois R, Beckers Y, Thonart P, et al.(2008)。家禽受到人类病原体的污染弯曲杆菌以及在农场层面降低其患病率的策略。生物技术，农艺，社会和环境3:317-334。［Ref。］
4. Al-Dughaym AM, Al-Tabari GF(2010)沙特阿拉伯Al-Ahsa市场上一些鸡肉产品的安全性和质量。沙特阿拉伯生物学杂志17:37-42。［Ref。］
5. Rob L, Andrew H, Peter C, Gerhard S(2003)风险概况:空肠弯曲杆菌和大肠杆菌家禽(整只和整块)。新西兰食品安全局的报告。［Ref。］
6. Ruberg F, Steinbrueckner B, Kist M (1998弯曲杆菌在人类感染期间菌株是罕见的。九宗诉讼的程序^th国际研讨会，开普敦，南非。65-68。
7. Ilida, MN, Faridah MS(2012)患病率空肠弯曲杆菌在鸡肉和鸡肉制品中。热带农业与食品学报40:63-69。［Ref。］

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条信息

文章类型:研究文章

引用:Sultana S(2017)孟加拉国达卡市家禽和家禽产品中弯曲杆菌的检测。《网络医学》目标1(1):dx.doi.org/10.16966/2577-1906.101

版权:©2017 Sultana S.这是一篇开放获取的文章，根据创作共用署名许可条款发布，该条款允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版的历史:

收到日期:2017年11月06

接受日期:2017年12月01

发表日期:08年12月,2017年