最近，我们展示未经处理的HIV感染患者在没有穿孔素的情况下表达表达丝氨酸蛋白酶Granzyme B（GRB）的调节B细胞的高外周血计数抓住细胞)[1]。重要的是,这些抓住细胞能够直接调节T细胞的增殖和存活吗体外和体内．作用机制涉及与T细胞中的GRBTO T细胞与GRBTO T细胞的无关转移和GRB依赖性降解[1,2]。

已知GrB的受体是甘露糖-6-磷酸受体(M6PR, CD222)，它以不依赖穿孔素的方式起作用，已被证明介导GrB的摄取和M6PR表达靶细胞的调控[3,4]。最近的一项研究李斯特菌M6PR在细胞毒T细胞上的差异表达直接与它们的存活和增殖能力[5]有关。因此，M6PR似乎代表了全身感染后T细胞扩展和记忆T细胞形成的一个重要检查点。

在这里，我们报告了我们目前的调查结果，证实了人类未经治疗的HIV感染患者的这种机制。由于在没有穿孔素的情况下GRB的细胞摄取可以以M6PR依赖性方式发生[3,4]，因此我们在来自未处理的HIV患者的T细胞上测试了M6PR的表达，并将其与健康对照进行了比较。这些实验表明，来自HIV患者的T细胞的M6PR表达明显高于来自健康对照受试者的T细胞（图1和表1）。此外，来自HIV的健康受试者的分离的T细胞的体外转染证实，HIV直接触发到T细胞上的M6PR（图2）。因此，我们的数据表明，HIV患者的记忆T细胞室中的缺陷至少部分是由于T细胞的M6PR的表达升高，与这些细胞对GRB相关的凋亡和生长停滞的更高敏感性。

表1:对HIV患者和健康对照者的临床、病毒学和免疫学特征进行GraB细胞和表达cd222的CD4检测⁺T细胞。
缩写:F:女性;M:男性;伽马线暴:Granzyme B;MFI:中值荧光强度;厦门市,不可用。

图1:T细胞来自未经治疗的HIV⁺与来自健康个体的T细胞相比，患者表达高水平的M6PR。来自4名未经处理的HIV患者的PBMC和来自4个健康对照受试者，并用荧光标记的CD3，CD4，CD8和M6PR（CD222）染色荧光标记的抗体。随后，CD4⁺（图1一个)和CD8⁺（图1 b)采用流式细胞仪检测T细胞。CD222表达以人外周血粒为阳性对照。直方图显示了4个具有代表性的实验中的一个具有相似结果的M6PR表面表达(左图)。条形图显示了M6PR的平均百分比⁺来自4个独立实验的T细胞(中间图)和M6PR中值荧光强度(MFI)值(右边图)。误差条表示SEM， *表示p<0.05， **表示p<0.005。

图2:健康人的T细胞在转染野生型NL4-3 HIV后上调甘露糖-6-磷酸受体(M6PR)。CD4⁺分离3例健康人T细胞，用CD3/CD28双探针和IL-2刺激3天。细胞被洗涤并转染NL4-3野生型(WT)或模拟转染，在37℃下6小时。转染3天后，用荧光标记的抗M6PR抗体(CD222)或同型对照对细胞进行染色。然后用流式细胞仪检测T细胞。使用内部ELISA (Abcam)检测培养上清中p24蛋白水平。直方图显示了三次具有代表性的实验中的一次M6PR表面表达，结果相似(左图)。柱状图显示了M6PR中位荧光强度(MFI)值(中间图)和p24水平(右边图)。误差条表示SEM， *表示p<0.05。

综上所述，我们的研究结果支持了当前的观点，即被细胞内病原体如病毒或细胞内细菌感染后，活化的T细胞在其细胞表面[5]上差异调节M6PR。这种差异的M6PR表达可能不仅解释了调节性T细胞在感染后如何启动效应T细胞收缩阶段，也有其他免疫细胞群表达伽马线暴没有穿孔素如血浆树突细胞或抓住细胞(2、6、7)可以直接抑制T细胞扩张M6PR和GrB-dependent时尚(图3)。调制的M6PR T细胞通过药理手段可能代表一个有前途的新颖的方法来调节T不同感染性疾病包括HIV感染的细胞介导免疫。

图3:HIV患者T细胞上的甘露糖-6-磷酸受体(M6PR, CD222)通过颗粒酶B分泌调节B细胞介导其抑制(抓住细胞）。在HIV感染期间，CD4的T细胞受体(TCR)⁺T细胞通过HIV蛋白直接被刺激nef.，不同时共刺激CD28。相对于完全激活的T细胞(左图)，这种未完全激活的T细胞分泌IL-21，但几乎不表达CD40L，从而诱导颗粒酶b分泌抓住细胞而不是浆细胞(右侧，版权所有2015)。美国免疫学家，Inc。）。通过在HIV感染过程中伴随CD222对T细胞的上调，强烈提高了T细胞的外源晶粒酶B的细胞摄取，导致其TCRζ链（放大罩）的切割增加。降低TCRζ链水平与这种T细胞的较低的增殖能力相关。通过外源添加CD40L多聚体，可以进行这种恶性圆圈的破坏，这可以在HIV感染期间不完全B细胞/ T细胞相互作用后抑制抓取细胞的产生。

参考文献

1. Kaltenmeier C，Gawanbacht A，Beyer T，Lindner S，Trzaska T等人。（2015）CD4 + T细胞衍生的IL-21和剥夺CD40信号传导有利于体内HIV患者中畸形B表达调节B细胞的研制。J免疫素194：3768-3777。［Ref。］
2. Lindner S，Dahlke K，Sontheimer K，Hagn M，Kaltenmeier C，等。（2013）白细胞介素21诱导的颗粒酶B表达B细胞浸润​​肿瘤并调节T细胞。癌症Res 73：2468-2479。［Ref。］
3. Motyka B, Korbutt G, Pinkoski MJ, Heibein JA, Caputo A, et al.(2000)甘露糖6-磷酸/胰岛素样生长因子II受体是颗粒酶B在细胞毒性T细胞诱导的凋亡中的死亡受体。细胞103:491 - 500。［Ref。］
4. Veugelers K, Motyka B, gooping IS, Shostak I, Sawchuk T, et al.(2006)颗粒酶B和穿孔素介导的颗粒杀伤需要一个甘露糖6-磷酸受体，并由细胞表面硫酸肝素增强。Mol Biol细胞17:623-633。［Ref。］
5. Ahmed Ka，Wang L，Griebel P，Mousseau DD，Xiang J（2015）甘露糖-6-磷酸盐受体的差异表达调节T细胞收缩。J Leukoc Biol 98：313-318。［Ref。］
6. jahrsdörferb，vollmer a，blackwell se，Maier J，Sontheimer K，等。（2010）人性血浆树突树突细胞产生的颗粒酶B抑制T细胞膨胀。血液115：1156-1165。［Ref。］
7. Hagn M, Sontheimer K, Dahlke K, bruegemann S, Kaltenmeier C, et al.(2012)人B细胞在不完全t细胞的帮助下分化为颗粒酶B分泌细胞毒性B淋巴细胞。免疫细胞生物学90:457-467。［Ref。］

在此下载临时PDF

条信息

文章类型：简短的沟通

引用:Kaltenmeier CT, Gawanbacht A, Hotter D, Kirchhoff F, Schrezenmeier H, et al.(2016)甘露糖- 6-磷酸受体，一种新的T细胞扩张检查点，在未治疗的HIV+患者的T细胞上高水平表达。J HIV艾滋病2(3):doi: http://dx.doi.org/10.16966/2380-5536.125

版权:©2016 Kaltenmeier CT等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版的历史:

收到的日期：2015年2月5日

接受日期:2016年4月27日

发表日期:2016年5月03