摘要

COVID-19是由SARS-CoV-2病毒感染继发的病毒性疾病，可导致严重的呼吸窘迫。COVID-19的诊断是一项重大挑战。目前，通过聚合酶链反应(PCR)检测鼻咽拭子或咽喉拭子检测SARS-CoV-2 RNA被认为是确认SARS-CoV-2感染的唯一有效方法。然而，这项检测有一些局限性，它用于筛查阴性、无症状人群仍有争议。血清学的文章是一种可能的替代诊断，当与临床和流行病学特征，并对人群和高危人群的持续筛查。我们观察到在初级保健环境中已经进行了快速血清学检测，这可能与快速检测和早期发现SARS-CoV-2感染有良好的相关性。因此，我们设计了本文提出的临床方案[clinicaltrials.gov ID Number NCT04316728]，以评估在初级保健环境中筛查和监测阴性无症状高危人群的血清学快速检测的临床表现和实际有效性。

关键词

2019冠状病毒疾病快速检测；血清学检测；IgG抗体；IgM抗体；初级保健；筛选

介绍

新冠病毒19是一种继发于SARS-CoV-2感染的病毒性疾病，可导致严重的呼吸窘迫[1]。新冠病毒-19的早期诊断是一项重大挑战，尤其是在初级保健环境中，患者通常会因为出现轻微症状或进行常规检查而要求医疗咨询。鼻咽或咽喉拭子是通过聚合酶链反应（PCR）检测SARS-Cov-2 RNA的常用样本，尽管目前将这种检测技术视为诊断COVID-19的金标准存在很大争议[2,3]。支气管肺泡灌洗液的RT-PCR显示阳性率最高（93%），其次是痰（72%）[4,5]。

尽管PCR具有很高的特异性和敏感性，但它在可同时检测的患者数量以及从取样到应答的时间方面存在一些局限性。此外，与其他取样技术相比，在紧急情况下使用拭子使卫生工作者更易受感染伊克斯。

此外，这是一个依赖于操作员的程序：如果样本采集不当，可能会导致大量假阴性。这是一个重大疫情紧急筛查的情况，一个操作员可以在一个班次内进行数百次拭子检查[6,7]。

出于所有这些原因，世界卫生组织（WHO）鼓励制定新的方案，以标准化诊断和治疗[8]。

最近的文献[9,10]表明，需要开发一种针对当前和未来疫情的快速检测方法。事实上，使用一种更有效的检测方法可以缩短从临床疑似新冠病毒-19到诊断的时间间隔，并可能增加在给定时间段内可以检测的人数。

这有两个主要相关后果：

A.进行快速诊断，以帮助医生做出临床决定，给出预后，并采取公共卫生行动，遏制和隔离病例和接触者[11]。

B.提供更准确的疾病传播图片，从而产生更准确的流行病学数据，从而触发量身定制的公共卫生响应和措施[12,13]。

C.表明RNA确认患者的特异性免疫反应[14]。

万岁^™新型冠状病毒IgM/IgG快速检测体外用于定性测定新冠病毒-19的IgM和IgG抗体的诊断试验。它可用于初级保健机构或二级和三级保健机构，可连续用于患者，同时可检测的患者数量完全取决于组织限制（如进行测试的卫生工作者人数，以及可能减少等待测试或已经测试并等待部门响应的人数的卫生设施的身体约束）。

在对一批因公共卫生和临床原因接受了新冠病毒-19血清学检测和RT-PCR检测的患者进行观察后，我们设计了SARS-CoV-2感染早期诊断和筛查的研究方案。

因此，这项研究的目的是了解VivaDiag的有效性^™在新冠病毒爆发期间对患者进行筛查的试验，以及该试验在监测疾病的临床进展、恢复和复发方面的有效性。

测试验证对RT-PCR：观察和假设

根据增加人群中新冠病毒-19感染检测次数的建议，我们建议对到初级保健机构进行常规检查或随访的无症状患者以及在门诊工作的医护人员进行血清学检测。从检测结果和匹配开始对那些出现症状或因流行病学标准而接受分子检测并进行血清学检测的患者进行新冠病毒-19 RT-PCR检测的结果同时，我们观察到来自不同检测技术的结果之间存在公平的对应关系，这提示了我们的研究假设。

如图1所示，我们在门诊所观察到的受试者为30名（56%男性，44%女性；总年龄60,9+2,71岁；x±SEM）。所有受试者都进行了RT-PCR检测（使用口咽拭子），作为新冠病毒19型症状携带者（n=15）或高危医务人员（n=15）。

图1:按性别分列的年龄分布(男性和女性);按组(医务人员和病人)正确的年龄分布。

RT-PCR按照世卫组织建议的方法和意大利卫生当局的指示进行。在PCR试验的同一天，使用VivaDiag进行快速免疫层析试验^™在4名患者中，由于紧急情况以及专业实验室进行PCR检测的困难，尚未提供RT-PCR结果。因此，对26个可用结果进行了计算。

使用McNemar精确检验进行统计分析，然后计算Cohen's k，这解释了非偶然确定的一致性量[表1]。

		万岁
		底片	阳性	T奥塔尔
rt - pcr	底片	17	0	17
	阳性	0	9	9
	全部的	17	9	26

表1：通过表获得的精确McNemar检验得出p>0.9999，而Cohen's k等于1（CI95%从1.0到1.0），例如，一致性根本不能归因于任何随机原因。

根据我们的观察，我们推测在初级保健环境中使用血清学检测有助于早期诊断和筛查可能感染SARS-CoV-2的患者和医护人员。因此，我们设计了以下研究方案，旨在更好地评估血清学检测的临床表现血清学论文和血清学快速试验在阴性无症状高危人群中检测和诊断新冠病毒-19的有效性。

材料和方法

定期到门诊部或初级保健诊所就诊的患者和工作的卫生工作者通过VivaDiag检测SASR-CoV-2^™新冠病毒-19 IgM/IgG快速检测。

根据clinicaltrial.gov[15]上公布的完整方案，我们在研究中纳入了在医疗诊所就诊且已知至少患有两种慢性病的成年患者和在同一医疗机构工作的医护人员

本研究旨在评估在新冠病毒-19爆发期间阴性患者的免疫反应，该试验在早期发现感染方面的临床表现，以及该试验在试验期间出现新冠病毒-19临床症状的患者中的可靠性。因此，到诊所就诊的患者会根据方案进行连续检测，每次就诊时都会记录病史，以评估是否存在SARS-CoV-2感染的症状，以及是否可能与诊断为COVID-19的其他人接触。

排除标准为：患有慢性呼吸系统疾病、已知免疫抑制或正在接受可能降低免疫反应的药物治疗的患者。

有冠状病毒-19临床症状的患者将接受冠状病毒-19 PCR-RT和VivaDiag检测^™新冠病毒-19 IgM/IgG快速检测。

对于快速检测呈阳性或无症状的患者，将采用新型冠状病毒感染症(COVID-19病毒)逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行检测，以判断两种检测方法的对应性。

万岁^™当满足以下条件时，新冠病毒-19 IgM/IgG快速试验呈阳性：

1. 检测到抗COVID-19igm抗体；
2. 检测抗COVID-19igg抗体；
3. 同时检测到IgG和IgM抗COVID-19抗体。

如果没有检测到抗COVID-19 IgG和IgM抗体，我们认为结果是阴性的，并且如果质量控制带C不着色，我们认为测试无效，而不管IgG和IgM条带是否着色。

后果

预期成果

主要结果：为了更好地了解该试验的临床表现，我们将评估试验结束时持续阴性结果且未出现新冠病毒-19临床症状的患者数量（真阴性），以及在出现SARS-CoV-2感染的临床症状之前，在试验期间对快速检测法早期检测CoV-19呈阳性的患者人数。

在那些暴露于SARS COV-2的患者中，我们的症状是，在怀疑感染时间有多少天之后，测试变得积极。此外，我们将考虑有多少患者在试验过程中没有对试验快速阳性的症状，也对PCR RTT有阳性反应。

次要结果：本研究的第二个目标是评估VivaDiag的准确性和精密度™ 在快速检测呈阳性的患者中，与PCR-RT相比，进行快速检测。

此外，为了更好地了解初级保健环境中的病毒暴露情况，我们将评估在试验期间有多少患者和多少医护人员呈阳性。

讨论

尽管血清学检测经常用于疑似病毒感染患者的筛查和诊断，但在科学文献中关于SARS-CoV-2的报道很少^™新型冠状病毒IgM/IgG快速检测体外用于定性测定新冠病毒-19的IgM和IgG抗体的快速诊断试验。我们设计的这项研究以及我们提出的方案旨在评估在初级保健环境中，对没有临床症状的SARS-CoV-19患者进行SARS-CoV-2感染早期快速检测的临床表现的免疫反应。

这项研究的主要投入来自我们对定期到初级保健机构就诊的一群患者进行的检测结果的观察，与SARS-CoV-2的RT-PCR检测结果比较。这一观察结果与Li Z等[16]关于特异性单克隆抗体IgM和IgG抗SARS-CoV-2作用的象征性研究相吻合。Li的研究似乎证实了该测试的有效性，以及与RT-PCR相比的优势。

Liu L等人[17]在一项对238名住院患者的研究中报告了类似的结果。相比之下，Cassaniti I等人报告说，在急诊环境和急性患者中进行试验时，试验表现不佳[18]然而，我们的研究设计旨在评估初级保健机构中的快速血清学检测，主要用于筛查高危无症状患者中的SARS-CoV-2感染。

根据先前的研究结果，我们推测血清学检测可用于在出现临床症状之前对阳性患者进行早期检测。此外，除了RT-PCR检测外，抗体检测也可以发挥重要作用[14]。由于该测试不需要特殊设备和培训，并且可以使用基本的个人防护设备进行，因此在初级保健环境中以及对大量患者和医护人员的快速筛查中可能特别有用，改善卫生系统对当前流行病的反应。此外，只要快速检测可能是低收入地区和发展中国家人口筛查的唯一可能战略，我们研究的结果可能对更好地设计和实施这些地区的未来干预措施至关重要。

我们的方案有一些局限性。因为本研究的主要目的不是评估血清学快速试验与RT-PCR相比的特异性和敏感性，我们只能依靠以前出版物的结果来评估两种试验之间的对应关系。这也意味着我们研究的结果y仅适用于活体动物™ 快速检测；尽管我们可以推测，当在相同的环境中使用其他血清学快速检测时，我们的研究结果将类似。此外，由于研究将在初级保健部门进行，我们无法跟踪因新冠病毒-19诊断而入院的患者以及这些sam中缺失的数据e患者可能会影响未来试验的结果。然而，我们相信，这项研究将为我们目前完全盲目行走的领域提供有价值的信息。

结论

综上所述，考虑到rt - pcr验证试验的良好结果(来自触发我们研究方案的初步观察结果)，即使排除由于偶然性(Cohen 's k=1;CI95%:从1到1)，基于上述考虑，我们认为迫切需要更好地了解快速检测是否真的有效和可靠，特别是对于我们在方案中提出的筛查目的。我们认为，我们设计的方案可以提供相关信息，以建立快速血清学检测在真实临床环境中的有效性，因此，我们鼓励基于我们的研究方案的其他研究，以更好地了解测试的临床表现。如果结果与我们的初步观察结果一致，这种或类似的快速检测方法可广泛用于医务人员和普通人群的Covid-19临床筛查，改善预防策略和应对疫情，同时增加对有或没有COVID-19症状的患者进行早期诊断的机会。

的利益冲突

作者无需报告利益冲突。

工具书类

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文章信息

物品类型：研究文章

引用：Capello F，Cipolla M，Cosco L，Gnasso A，Mancini R，et al.（2020）用于筛查和早期诊断无临床症状患者中的新冠病毒-19 lgM/IgG的VivaDiag快速试验。Int J内分泌代谢二序列6（1）：dx.doi.org/10.16966/2380-548X.167

版权：©2020卡佩罗F等人。这是一篇根据《知识共享署名许可证》条款发行的开放获取文章，允许在任何媒体中不受限制地使用、发行和复制，前提是原创作者和来源均已获得授权。

出版的历史:

收到日期：2020年4月4日

接受日期：2020年4月27日,

出版日期：2020年5月7日