抽象的

背景和目标

草药洁牙剂在亚洲和欧洲的大部分地区迅速普及。尽管已记录了洁牙剂对致病菌斑微生物的影响，但很少或没有证据表明其对有益微生物区系的影响，这有助于阻止致病菌株。本研究试图评估比较草药牙膏和传统牙膏的效果。

方法

60名学生参与者在年龄组18至28岁，良好的口腔卫生（OHI得分= 0）被随机分为两组，测试和控制。试验组使用草药洁齿剂和对照组定期洁齿剂。在基线上收集斑块和唾液样品，在刷牙后立即收集，刷涂后12小时，1周和1个月，并培养。在各种时间间隔估计链球菌菌炎和乳酸杆菌与总微生物计数。

结果

第1天显示测试和对照组之间的显着差异，关于链球菌和乳酸杆菌计数以及总CFU（P> 0.05），但在一周的对照组时显示斑块和唾液中的链球菌数目差异（p> 0.01）。然而，测试组在刷牙后，唾液中的L.芽孢杆菌和CFU数量大幅增加，在一个月（p> 0.01）进行评估时刷涂后12小时。

结论

当与常规的洁齿剂草药牙粉可以是有益的口腔微生物群落的保存稍微更有效，虽然两者在抑制病原微生物同样有效。

关键词

洁齿剂;草药代理商;有益细菌;病原细菌;牌匾

介绍

牙菌斑是牙龈炎症中的主要病因因素，随后是慢性牙周炎的病症，由于Suprictival斑块进入龈下区域的顶端延伸[1]。口腔微生物是多样的，包括物种如Neisseria，葡萄球菌，S.肺炎，卟啉尼肌牙龈，白喉，Fusobacteria和Hemophilus［2］．有用的共生包括链球菌血糖，链球菌肿瘤，链球菌唾液，乳酸乳球菌，乳酸杆菌酪虫，鳞片瘤瘤和放样粘液剂有害的包括pvovotella介质，p.gingivalis和actinobacillus放电瘤细胞，t. forsythia，t.denticola［2］．共生细菌最重要的特征是它们能够阻止宿主免疫系统的激活。一种被提出的机制是耐受性的发展，包括抑制性t淋巴细胞的产生和抑制性细胞因子的存在，主要是转化生长因子- β和白细胞介素(IL)- 10，它们区分共生生物和致病生物，前者有助于耐受，后者诱导强大的适应性免疫应答。因此，化学菌斑控制不仅要有选择性地消除病原微生物，而且要有效地保存有益菌群。有效地减少口腔有害菌群，有效地促进口腔健康。消除微生物菌斑生物膜可预防牙龈炎、牙周炎和龋齿。研究表明，牙菌斑可以通过物理清除、使用牙膏和漱口水来控制[3,4]。然而，传统的牙膏也有其局限性;例如，在正确的地方(口腔)和正确的时间使用正确浓度的氟化物(需要非常低的浓度)，(在疾病发生的口腔中持续使用)，这有利于控制龋齿的效果。 Similarly, triclosan, a common ingredient in toothpastes, has been suggested to have carcinogenic, mutagenic, or teratogenic effects [5]. Because of their widespread use over many years, the issue of the emergence of bacterial resistance has been raised, particularly in relation to the possible development of concomitant resistance to clinically important antimicrobials [6].

另一方面，草药洁牙剂具有不含染料或人工香料、具有抗菌、抗真菌和抗菌活性的优点。研究表明，草药牙膏中的印楝提取物适合治疗牙龈炎和口腔感染，因为它可以抑制菌斑的形成和细菌的生长[7] 。迄今为止，有关草药洁牙剂的临床研究报道不足。只有有限数量的体内关于草药洁牙剂的研究已经发表，表明它们在减少牙菌斑方面可能等同于传统洁牙剂。尽管有关于洁牙剂对致病性牙菌斑菌群影响的积极报告，但关于洁牙剂对口腔中有益细菌的影响的报告有限或没有因此，本研究旨在评估草药和市售牙膏的抗菌效果，以及它们对有益细菌种类、链球菌和细菌的影响乳酸菌唾液中的级别。

材料和方法

在获得班加罗尔牙科科学和研究生研究所伦理委员会的批准后，这项试点研究在该研究所18至28岁的学生中进行。60例符合纳入标准的患者随机平均分配到试验组或对照组;每组由15名男性和15名女性组成，从而消除了年龄和性别偏见。

入选标准:

• 患者良好的口腔卫生（OHI得分= 0）。
• 选择的排除标准
• 受任何全身疾病的主体。
• 受试者在研究前三个月有任何药物摄入史，包括抗生素、止痛剂或任何其他药物
• 最近的历史或任何急性或慢性感染的存在。
• 身心障碍的患者。
• 存在固定的正畸家用电器。
• 吸烟者/paan/烟草/槟榔使用者。

为了避免随身效果，在基线计数之前给出了两周的洗涤时间。随机化通过绘制批次并随机将患者分配给试验和对照组来完成。试验组被施用草药套路（喜马拉雅毒品公司，班加罗尔）和对照组Pepsodent G（Hindustan Unilever Limited，Mumbai）。所有参与者都获得了口腔卫生指示，并指示每天两次使用给定的洁齿剂（每12小时）。以下使用洁齿剂的使用后，从两组患者收集斑块和唾液样品，如下所示：培养收集的样品，比较了链球菌和乳杆菌计数的菌落。

唾液收集

通过在无菌Eppendorf管中进行未经暗示的唾液。

斑块集合

在刮刀的帮助下，从摩尔的舌和颊表面收集斑块，然后放置在填充有盐水的Eppendorf管内。

实验室程序

所有样本都经过超声15秒，然后用磷酸盐缓冲盐水(PBS)连续稀释10倍至10倍^7..然后使用环瘤器涡旋稀释的样品。根据制造商的说明制备所需的板数计数琼脂（Hemedia M091）。将100μl每种稀释的样品转移到无菌一次性甲状腺细胞（90mM）中。将制备的板数琼脂保持在熔融状态并保持在450℃。将约15至20ml加入到甲状腺作用中并使其固化。凝固后，将纤维化物反转并转移到37℃的细菌培养箱中，并孵育24至48小时。使用表达为CFU / mL的细菌菌落计数器手动计算菌落

计算=样品的菌落体积添加×稀释因子

对于特定的生物特异性和选择性的培养基中如下使用。

苦霉菌：HIMEDIA M259按照制造商的说明制备，用于隔离和计数脑膜炎菌道。样品加工和电镀程序类似于总食数。

乳酸杆菌夫人：Himedia是按照制造商的说明准备的。这是一种选择性分离和枚举乳酸菌种的培养基。样品加工和电镀程序类似于总食数。

微生物总数分析:Hemedia的板数琼脂（M091）用于枚举总有氧微生物计数。

统计分析

使用SPSS（社会科学统计包装）进行分析所获得的数据，适用于Windows，可安装的软件，可以使用多个统计功能评估数据。完成Mann-Whitney U测试，以比较S. Metis和对照组的测试和对照组，在1天，1周和1个月内斑块和唾液样品中的斑块和唾液样本中的CFU计数。

结果

共60例，男30例，女30例，年龄范围在18至28岁完成了这项研究。在第1天的末尾，有相对于测试之间与对照组没有差异显著链球菌,乳酸菌并且在斑块样品中的总CFU计数具有5％（p> 0.05），表明斑块样品中的计数在0'和12小时（表1）。类似地，测试和控制组之间没有显着差异链球菌，乳酸菌第1天唾液样本的总CFU计数(p>0.05)再次表明，刷牙前、刷牙后和刷牙后12小时的唾液计数变化不大(表2)。

另一方面，在1周结束时，对照组中的斑块和唾液样品中的斑块和唾液样品在刷牙（P> 0.01）（表3）中有显着增加（表3），而在试验组中，存在大幅增加乳酸菌在刷涂前和12小时后进行计数，并且在仅在唾液样品中刷涂之前和之后的总CFU计数（p> 0.01）（表4）。

随后，在1个月结束时，'0'小时斑块样品显示试验组中的乳酸杆菌数目升高（P> 0.01）（表5）。类似地，在刷籽唾液样品之前和之后均显着增加了试验组中的乳酸杆菌（P> 0.01）（表6）。相比之下，12小时唾液样品显示对照组的总CFU计数显着增加（P> 0.01）（表6）。

表格1：关于测试与对照组关于的比较链球菌，乳酸菌在第1天采用Mann-Whitney U检验斑块样品中和总CFU计数

表2：测试与对照组关于S. metis，L.芽孢杆菌和CFU在1天的唾液样品中的比较

表3：关于测试与对照组关于的比较S. Metis，L. Bacillus并且在1周的斑块样品中的总CFU计数

讨论

大多数洁齿剂今天可用，保证完整的口腔健康，并为牙龈和牙齿完全照顾。草本洁齿剂已经在很长一段时间内使用，并且在亚洲大部分地区和欧洲的大部分地区都是迅速的普及，主要是因为它们是自然的，并且在大多数商业上可用的洁齿剂中没有苛刻的化学品。

抗菌剂旨在防止生物膜的形成和/或去除已形成的生物膜。相反，抗菌剂的作用方式包括抑制生长或杀死目标细菌，以其最小抑菌浓度（MIC）或最小杀菌浓度（MBC）表示然而，作为生物膜生长在表面的细菌对抗菌剂杀灭的敏感性降低，尤其是在年龄较大（更成熟）的人群中生物膜。因此，配方的一个主要要求是在刷牙的两分钟内提供足够浓度的抑制剂，以确保保留在口腔的牙齿和粘膜表面，从而使活性成分随着时间的推移以仍能提供生物活性的水平释放产品滞留被称为实质性，不同抗菌剂之间差异显著[8]。牙膏确实通过有利地减少牙菌斑中所谓的致病细菌[9]来实现这一目标。含有三氯生的牙膏据称具有广谱抗菌活性；还可以减少炎症[10]亚致死水平的三氯生也能抑制口服链球菌产酸和蛋白酶活性牙龈.当三氯烷与稠合的抗微生物剂如锌相结合时，报告了添加剂抗牙菌斑和抗牙龈炎效应。表面活性剂如十二烷基硫酸钠可以破坏生物膜结构，损伤细胞膜和杀死细菌（当在高浓度下存在时）和抑制酶（在较低浓度下）[11]。虽然在口腔护理产品中使用的许多抗微生物剂被描述为广谱，但在口腔使用条件下（可变浓度/短接触时间），它们可能具有有利的选择性作用，其中它们主要抑制生长和代谢在疾病中涉及疾病的生物体，同时将与口腔健康相关的人相对不受影响[12,13]。斑块还含有某些细菌，通过保持荷湾的致病菌株在牙周健康中起着非常重要的作用[14-16]。共谋细菌就像唾液链球菌和乳球菌乳酸其中很少。唾液链球菌被发现抑制了吗金黄色葡萄球菌研究表明，感染和乳酸乳杆菌会产生尼辛，尼辛是一种细菌素，或一种抑制类似细菌的毒素。尼辛还可用于预防食品工业中的细菌病原体[17]。唾液链球菌与其他口腔共生菌一样，在抑制致病性酵母样蛋白方面发挥着重要作用念珠菌白葡萄酒在人类口腔上皮细胞中[18]。此外，S。唾液链球菌已知菌株K12可产生细菌素，使其在抑制细菌生长方面发挥作用链球菌Pyogenes和其他细菌想引起麻疹病[19]。它还表达口腔低位pH条件下的脲酶，导致尿素水解成二氧化碳和氨并最终升高的pH。pH的升高会产生一个不利于酸性细菌的环境变形链球菌[20].乳杆菌酪蛋白是已被证明支持健康细胞功能和免疫系统反应，同时促进健康的细菌和修改有害细菌的活动[21]另一种常见的口腔微生物。通过劳拉沃尔特研究[22]表明，使用木糖醇是洁齿剂的组分可能导致L.抑制球菌随着时间的推移，但不具有对唾液链球菌和干酪乳杆菌具有不利影响

表4：测试与对照组关于S. metis，L. bacillus的比较，1周唾液样品中的芽孢杆菌和总CFU计数

表5：关于测试与对照组关于的比较S. Metis，L. Bacillus和总CFU计数牌匾1个月的样本

表6：关于测试与对照组关于的比较S. Metis，L. Bacillus和总CFU计数唾液1个月的样本

据我们所知，到目前为止，没有临床研究评估了化学抗斑块对有用的微生物的影响。许多研究侧重于各种药物对致病斑块的治疗效果。然而，尚未评估这些试剂对有用的微生物的阳性或负面影响。因此进行了本研究以评估这些牙本料对2种有益细菌种类的影响，链球菌脑膜炎炎和乳酸菌并且在牙周和系统性健康受试者上的总微生物计数。决定以基于常规商业洁齿剂制备的原料以各种时间间隔评估微生物计数，即口腔可以在其使用后保持斑块12小时。因此，收集斑块和唾液样品并以3间隔评估，以评估这些牙本料的实际效果。

甲洗出2周期间保持为主要排除由患者使用的以前的洁牙剂，如果任何的残留效果，。这样做是为了消除任何偏见，并就研究方案保持标准化。

从结果中显而易见，在斑块中的草药和常规洁齿剂组中没有发现显着差异以及相对于的唾液样本链球菌,乳酸菌使用后第1天各时间间隔的CFU计数。然而，在1周结束时，牙菌斑和唾液样本显示，与草药牙菌斑组相比，传统牙菌斑组刷牙前的口腔链球菌计数显著增加。另一方面，刷牙后即刻和刷牙后12小时，中药牙膏组唾液样品的乳酸菌计数和总CFU计数均显著高于常规组。同样的，在1月底乳酸菌牙菌斑和唾液数比用在链球菌计数没有区别常规组中草药牙膏组显著高。在另一方面，所述12小时唾液样品中的总CFU计数分别为常规牙粉组显著高。相比于常规的传统牙膏时，这些研究结果清楚地表明由中草药牙膏对口腔微生物群落的一个更有效的保护。此外，在较长的时间周期，中草药牙膏也表现出比传统牙膏更好的抗菌效果。此抗微生物活性是根据其中的草药洁齿剂被发现是抗牙斑微生物有效的研究[24-28]。截止到目前为止，还没有研究阐明牙粉或进行了有益的共生细菌的任何其它抗牙斑剂的效果。用牙膏的辅助刷牙是用来保持口腔清洁，因此，当务之急是要得到它的影响广阔的视野上的菌斑菌群，无论是有益的或其他的基本工具。这是此类评估相同的第一项研究，并很明显，中草药牙膏中被证明在有益菌比传统的对应保存到稍好是。

结论

虽然由常规和草药洁齿剂的健康微氟氯罗拉因缺乏统计学意义而有效地保存，但是草本洁白剂原因变得略微更好;虽然两个洁齿剂同样有效地减少致病斑块和保持口服卫生。此外，需要进行关于较大横截面的长期研究，建议进行诸如PCR的更敏感的测试以评估抗微生物活性。

致谢

作者希望感谢并感谢印度班加罗尔m/s喜马拉雅制药公司为本项目提供的资金，以及前医疗服务和临床试验负责人Prahlad Patki博士和喜马拉雅制药公司Sandeep Varma博士为开展本研究提供的宝贵协助，以提供该药物用于分析研究生化参数的样本及其实验室设施。

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文章信息

文章类型：评论文章

引文：谢蒂S，Thoudam B，玻A（一个草药牙粉的影响及有益口腔微生物群落一个常规牙粉的2015比较评价 - 甲临床 - 微生物学研究诠释J登特口腔健康1（3）：DOI HTTP：// DX.doi.org / 10.16966 / 2378-7090.117

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出版历史记录：

收到日期:2015年3月20日

接受日期：2015年6月8日

发布日期：2015年6月12