摘要

目前的研究调查了吸烟习惯对口腔念珠菌存在的影响。研究组包括50名健康吸烟者（年龄范围20-50岁，平均26.78岁，平均25岁，标准差±6.9）作为参考，我们检查了一组50名年龄和性别相似的健康非吸烟者。本研究首次使用Diaslide装置，该装置经过改进，可提供念珠菌菌落的定量评估。

在评估吸烟对念珠菌影响的所有参数中，吸烟者唾液中的菌落数是唯一显著高于非吸烟者的参数（p=0.037）。

目前的研究表明，与口腔干燥、免疫缺陷疾病或抗生素治疗等其他已知因素相比，吸烟似乎对念珠菌菌落的生长有较小的影响。建议对年龄和吸烟习惯不同组合的参与者进行重复研究，并可能研究不同念珠菌种类与口腔吸烟之间的差异。

关键字

假丝酵母；吸烟；一水硬铝石

介绍

白色念珠菌是从口腔[1]中分离出来的最常见的真菌种类，从舌背后部很容易培养。这种二形真菌可分为两个阶段:芽孢子阶段和菌丝阶段。后者可以更深入地渗透到组织中，特别是当宿主防御机制被破坏时。

许多研究发现，吸烟单独或联合其他因素可能是口腔念珠菌病的重要诱发因素，尽管这种关系或其对口腔念珠菌致病的影响还远未被解决[2]。虽然一些研究表明，吸烟不会显著影响念珠菌的携带[3-8]，但也有报道称，吸烟显著增加了念珠菌的患病率[9-11]。吸烟似乎对免疫缺陷个体中假膜性念珠菌病的发病率有一定的影响。

烟草或雪茄烟可能影响念珠菌携带的确切机制尚未确定[2]。有人认为吸烟可能导致局部上皮改变，从而导致念珠菌定植[9]。香烟烟雾也可以为白色念珠菌提供营养[13]。这一假设具有重要意义，因为香烟烟雾中的芳香烃也可能通过念珠菌物种中存在的诱导酶系统转化为致癌终产物[14,15]。这些理论提供了部分解释，为什么吸烟者比其他白斑更容易患念珠菌性白斑，其恶性变化的可能性更高[16,17]。

Diaslide装置是一种用于鉴定尿细菌菌落[18]的临床工具。目前的研究是第一个使用一水硬体装置的研究，该装置通过将原一水硬体(MacConkey琼脂)的生长培养基替换为琼脂Sabouraud，一种含有氯霉素的念珠菌选择性培养基[19]，以抑制细菌的存在。在目前的研究中，它被用作临床工具来提供念珠菌菌落的定量评估(图1)。

本研究的主要目的是验证吸烟和口腔念珠菌菌落的定量评估之间的联系，使用改良的一水舒利德作为定量临床工具。

材料和方法

研究小组包括50名年龄在20-50岁的健康吸烟者(25名男性，25名女性)(平均26.78)。匹配的对照组包括50名健康的非吸烟者(27名男性，23名女性)，年龄在20-50岁(平均25.94岁)。

“吸烟者”一词指的是每天吸烟超过10支，且至少三年的参与者。计算“包年”参数(每天香烟数乘以吸烟年)。

“非吸烟者”一词定义的是从未吸烟或至少五年不吸烟的参与者。

“健康”一词的定义是，没有任何损害性疾病的参与者没有接受任何称为促进口腔念珠菌病的治疗（抗生素、类固醇、高血压药物、缺铁性贫血、糖尿病、艾滋病等）。

念珠菌培养的样品从舌头后部和唾液中获得。为了将口腔念珠菌存在的影响降到最低，我们至少在进食、饮水和任何口腔卫生程序后两小时采集样本。

取样方法:假丝酵母菌定量评价工具包括改良的diaside装置。最初的装置参考了来自尿液[18]的细菌菌落。

改良的装置平台为沙波拉德葡萄糖琼脂，念珠菌选择性，含有氯霉素抑制细菌的存在。在Sabouraud培养基中加入抗生素、染色剂和一些盐进行抑菌，并作为酵母指示剂[19]。

该装置包括一个铰接的壳体，其中包含两个相对的琼脂Sabouraud培养基，由一端带有手柄的取样器和另一端的两个弯曲的取样器尖端分开。小费首先浸入样本中。然后将取样器从外壳中取出，同时接种琼脂的两个表面。

接种白色念珠菌的主要目的是为了引入一个具有念珠菌菌落特征的参考图表。仪器校准是根据已知的念珠菌浓度(CFU/mL)进行的，以便能够比较不同的培养物(图1)。基于这些校准，在树脂上获得的菌落数量可以转化为念珠菌生长的定量程度。

• 获得以下结果（CFU/mL）；
• 10^2./ml-一个菌落
• 10^3./ml -两个菌落
• 10^4./ml - 20个菌落
• 10^5./ml - 20个菌落以上

从舌后(盲肠孔前)和唾液(收集2ml到试管中)取培养物，这是念珠菌生长最频繁的区域(1)。包含样品的设备已在37摄氏度下孵育48小时，阳性念珠菌载体是基于培养[4]中的一个或多个菌落生长。

统计评估用于分析研究结果:卡方检验用于评估念珠菌携带患病率和吸烟之间的关系。采用t检验评估念珠菌携带与吸烟数量和持续时间之间的关系。Mann-Whitney检验用于评估研究组与对照组念珠菌菌落计数之间的关系。采用Spearman相关性评价研究组念珠菌菌落计数与吸烟数量和持续时间的相关性。P < 0.05为差异有统计学意义。

结果

吸烟与念珠菌携带之间的关系如表1所示。尽管在吸烟者唾液和/或舌头中念珠菌阳性培养的患病率较高（56%和50%），但未发现统计学意义。

图1:原Diaslide装置是用于尿液细菌菌落鉴定的临床工具，因此以MacConkey琼脂为培养基。用沙波罗琼脂替代生长培养基改良的Diaslide装置作为临床工具，提供念珠菌菌落的定量评估。根据已知的念珠菌浓度进行仪器校准，以便不同培养物的比较。

吸烟持续时间和每日吸烟量对念珠菌携带患病率的贡献被检查。结果显示，在念珠菌携带的这两个参数中，没有任何显著的趋势。

对吸烟者中与吸烟量和吸烟时间相关的念珠菌菌落计数进行了检查，其中3个和5个菌落的浓度分别超过103（3个菌落）和接近104（5个菌落）。唾液\舌头菌落数量与吸烟年限或香烟消费量之间未发现显著相关性。

表2列出了研究组和对照组念珠菌菌落数之间的相关性。唾液中的菌落数是唯一显著的发现，表明50名吸烟者（平均1.04个菌落）中念珠菌的患病率较高，而50名不吸烟者中只有0.5个（p=0.037）。当这些发现转化为CFU/mL时，研究组唾液中的平均菌落数为100 CFU/mL，而非吸烟者的平均菌落数低于100 CFU/mL。

讨论

关于吸烟习惯和口腔念珠菌之间可能存在的联系，文献中提出了几个假设:影响念珠菌[9]定植的粘膜变化，烟草[13]中发现的亲念珠菌因子，唾液酸化(部分由吸烟引起)和念珠菌[20]携带状态之间的相关性。尽管有这些证据，但关于吸烟与口腔念珠菌相关性的文献报道并不一致[3-11]。

本研究测试了各种参数，以描述吸烟和口腔念珠菌之间的关系。研究了吸烟时间和吸烟量对念珠菌流行率的影响。研究人员还对舌根文化和唾液文化进行了比较。我们使用改良过的单一化装置[18]对念珠菌菌落进行定量评估。于1894年提出的Sabouraud葡萄糖琼脂至今仍是病原真菌[19]初步分离最常用的培养基，也是本研究改良装置的培养基。当前的研究与课程的课程由奥利弗和他的合作伙伴[4],因为他们的研究包括100名参与者(37人是烟民),并演示了candidal菌落计数和吸烟之间的关联,并无显著相关性candidal马车和吸烟的习惯[4]。

集团	N	马车,唾液 样品(%)	马车,舌头 样品(%)	马车, 总数（%）
研究	50	(54%)27	(42%) 21	28 (56%)
控制	50	22 (44%)	14 (28%)	(50%)25

表1:念珠菌携带在吸烟者和不吸烟者之间的比较，即吸烟和念珠菌携带之间的联系。

集团	菌落总数 来自唾液	菌落总数 源于舌头
研究	52	26
复样	25	16
P值	0.037	0.132

表2:与非吸烟者相比，吸烟者的念珠菌菌落计数，即研究组和对照组的念珠菌菌落计数之间的相关性，根据指数（CFU/mL）读取。

10^2./ml-一个菌落

10^3./ml -两个菌落

10^4./ml - 20个菌落

10^5./ml - 20个菌落以上

当前的研究,以及研究了奥利弗和他的合作伙伴[4]可能表明一个假丝酵母和吸烟之间的联系发展而candidal马车之前已经存在的开始吸烟,烟草只有浓度的增加导致酵母诱导粘膜的变化,释放烟草[13]中发现的亲念珠菌因子，并酸化唾液pH，如念珠菌[20]。

这项研究表明，与口腔干燥、免疫缺陷疾病或抗生素治疗等其他已知因素相比，吸烟对念珠菌菌落生长的影响很小。

本发明非常便于操作，但作为念珠菌的定量测量工具可能受到限制。该装置包括一个铰接的壳体，该壳体包含两个相对的琼脂培养基，由一端有手柄的取样器和另一端有两个弯曲的取样器尖分开。首先将取样器的尖端浸入样品中。然后将取样器从外壳中取出，同时接种琼脂的两个表面。因此，即使当细菌浓度超过10 CFU/mL[6]时，也可以观察到单个菌落。稀释镀[18]法测定的菌落数与每毫升CFU呈线性相关。它的主要缺点是结果仅限于数量级。此外，它狭窄的尖端可能会限制舌头取样时的预期结果(在以前的研究[4,9]中，较高的计数从舌头)。然而，进一步的技术改进可能会提高其功效。例如，将取样器的尖端修改为宽而平，类似于刮舌器。

研究组吸烟者的平均年龄相对较低。年龄差异较大的年龄组可能表现出念珠菌携带者的较高表达，但老年可能表现出多种因素，如健康受损、处方药等。

这项研究的另一个限制是相对少数参与者几十年来一直在吸烟,每天几十个香烟(大多数吸烟者的研究熏不到十年,不到一天二十支烟),可能更多样的组吸烟者,吸烟的时间和数量,会对念珠菌菌落数量产生不同的影响。本研究的另一个局限性是没有对不同的念珠菌种进行分离，而是对念珠菌的菌落进行了检测。吸烟时间和吸烟量对某些物种的影响可能比其他物种更大，调查念珠菌和吸烟之间的这方面的关系可能会证明有价值的结果。

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条信息

文章类型:研究文章

引用:Becker T, Porat D, Meir Gorsky(2015)吸烟习惯与口腔念珠菌的关系。国际牙科医生口腔健康1.2卷:http://dx.doi.org/10.16966/2378-7090.107

版权:©2015 Becker T等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源

出版历史：

收到日期:2015年2月02

接受日期:2015年3月25日

发表日期:2015年4月30日,