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研究文章
一种新的自动化的Abbott Architect降钙素原检测方法与Biomerieux Vidas和Roche Elecsys方法的比较

梁志文＊京在HAU黎伟文

香港威尔斯亲王医院微生物学系

*通讯作者:香港威尔斯亲王医院微生物学系梁志文电话:+ 852 - 3505 3342;电子邮件:lcm414@ha.org.hk


摘要

目的:比较新的Abbott Architect PCT免疫分析方法与Biomerieux Vidas和Roche Elecsys建立的PCT方法。

方法:使用Architect和Vidas方法对78份已在Elecsys PCT检测中检测过的冷冻样品进行分析，并使用回归分析、Bland-Altman差值图和三种临床诊断PCT水平临界值(0.1、0.25和0.5 ug/L)的一致性分析进行比较。

结果:Architect PCT检测与Vidas (R=0.954)和Elecsys(R=0.972)检测具有良好的相关性。在三个临床相关临界值时，两种参考方法的诊断符合率分别为93.6 ~ 94.8% (0.1 ug/L)、91.0 ~ 93.6% (0.25 ug/L)和98.7 ~ 100% (0.5 ug/L)。

结论:我们的研究结果表明，新的Architect BRAHMS PCT分析方法与Vidas和Elecsys PCT方法比较具有良好的相关性。Architect PCT分析适用于临床诊断PCT测量。

关键字

原降钙素;建筑师PCT;免疫测定;脓毒症


介绍

降钙素原(PCT)是降钙素的前体，是用于诊断细菌感染和败血症的生物标志物。已经证实，PCT水平在感染后显著增加，在康复后显著下降。临床PCT水平测量在过去10年获得了全世界的认可。PCT是一种功能蛋白，由114 ~ 116个氨基酸组成。它是一种具有多种功能的免疫调节剂，将其与其他已知的炎症活性分子(如细胞因子、白细胞表面标记物、急性期蛋白或临床可检测的炎症迹象)区分开来。PCT具有特殊的功能，机体对其水平的调节非常严格，它是细菌诱导的全身炎症反应[2]存在的一个特别好的指标。

以全身炎症反应为特征的细菌感染诱导PCT，导致其水平升高。健康人的血清或血浆可溶性PCT浓度通常低于0.1 ug/L，而当浓度超过0.5 ug/L时，应考虑脓毒症或全身炎症反应[2,3]。

在BRAHMS PCT Kryptor方法从最初的BRAHMS发光免疫分析(LIA)[4]发展而来之后，一些诊断公司，如Biomerieux和罗氏，与BRAHMS合作，通过不同的技术在各自的平台上开发自动PCT检测方法[5,6]。最近，雅培开发了一种新的在Architect平台上运行的自动定量BRAHMS PCT分析。在本研究中，我们比较了这种新开发的PCT检测方法与Biomerieux Vidas和Roche Elecsys PCT检测方法在血清样本中的分析性能。

材料和方法
研究样本

2017年2月至7月，香港威尔斯亲王医院化学病理科收到的常规PCT检测标本共78份，首次使用Elecsys PCT免疫分析法进行分析。常规检测后，将等量的血清标本保存在20℃，待进一步分析。

研究设计

为了进行比较研究，等量物在室温下解冻，充分混合，然后由Vidas和Architect分析，并在同一天进行PCT测量。将Architect PCT分析性能与Vidas和Elecsys PCT分析结果进行比较。

PCT免疫测定方法的描述

Architect PCT分析是一种两步免疫分析方法，用于定量测定血清和血浆中的PCT，使用的是自动Architect系统分析仪上的化学发光微粒子免疫分析(CMIA)技术。样品中出现的PCT与抗PCT包覆的微粒子结合。洗涤后，加入抗pct吖啶标记的共轭物，形成反应混合物。在另一个洗涤循环之后，将预触发和触发溶液添加到反应混合物中。由此产生的化学发光反应被测量为相对光单位(RLUs)。样品中PCT的数量与Architect系统光学检测的rlu之间有直接的关系。本试验的校准需要6个校准器一式两份。本方法的样本量为150 uL，测量间隔0.02 ~ 100 ug/L，最高检测限(LoD)为0.00 ug/L，定量限(LoQ)为0.01 ug/L。在本研究中，在i1000分析仪上运行Architect PCT分析。

比较PCT免疫分析，使用mini Vidas分析仪进行酶联荧光分析(ELFA)，使用Cobase601分析使用电化学发光免疫分析(ECLIA)进行PCT检测。根据厂家介绍，Vidas和Elecsys的PCT检测限(LoD)分别为0.03 ug/L和≤0.02 ug/L，功能灵敏度(LoQ)分别为0.05 ug/L和0.06 ug/L。

质量控制

所有三种检测方法都根据制造商的说明书进行校准和质量控制材料的分析。控制材料的结果在各自制造商的限制范围内。

精度研究

在Architect i1000分析仪上对3个水平对照进行PCT测定分析，5天内每次运行5个重复，以估计分析内和分析间的不精密度。该研究遵循临床和实验室标准协会(CLSI)指南EP15 A3[7]。德赢vwin首页网址

统计分析

采用线性回归分析，用Spearman相关系数和Bland-Altman不同图比较不同测量方法[8]，用kappa统计[9]计算三个临床诊断临界值在0.1、0.25和0.5 ug/L时的一致性。统计学意义水平为p<0.05。统计分析使用MedCalc, version 15.0 (MedCalc Software, Ostend, Belgium)进行。

结果

在0.05 - 24 ug/L范围内，78份样品的Architect PCT分析与Elecsys和Vidas PCT分析之间存在良好的相关性。其中，Architect与Elecsys之间的线性回归系数(R)为0.972(图1,y=0.014+0.962x)， Architect与Vidas之间的线性回归系数(R)为0.954(图2,y=0.024+0.773x)。

图1:Architect PCT和Elecsys PCT的线性回归

图2:Architect PCT和Vidas PCT的线性回归

Bland-Altman图分析结果如图3和图4所示。Architect和Elecsys之间的平均偏差为-0.1 ug/L, 95%一致上限为-1.2至1.0 ug/L(图3)。Architect和Vidas之间的平均偏差为-0.5 ug/L, 95%一致上限为-3.5至2.5ug/L(图4)。

图3:Architect PCT和Elecsys PCT的绝对差值Bland-Altman图(ug/L)，实线为均值偏差;虚线是在95%置信区间上和下的一致性水平

图4:Architect PCT和Vidas PCT的绝对差值Bland-Altman图(ug/L)，实线为均值偏差;虚线是在95%置信区间上和下的一致性水平

在0.1、0.25和0.5ug/L的临床相关阈值下，与Vidas和Elecsys PCT检测方法比较，评估了Architect PCT检测的诊断性能(表1)。结果表明，在0.1、0.25和0.5ug/L的三个相关诊断阈值下，Architect PCT检测与两种参考方法具有可比性。0.25和0.5 ug/L。特别是，Architect和Vidas之间的诊断一致性非常好，0.1 ug/L时的诊断一致性为93.6% (κ， 0.84)， 0.25 ug/L时的诊断一致性为93.6% (κ， 0.82)， 0.5 ug/L时的诊断一致性为98.7% (κ， 0.97)。在0.25 ug/L和0.5 ug/L时，Architect和Elecsys的一致性极佳，分别为93.6% (κ， 0.87)和100% (κ， 1)。

降钙素原切断量(ug/L) Elecsys 维达
0.1 93.6%;κ,0.76
(95%可信区间0.56 -0.96)		 94.8%;κ,0.84
(95%可信区间0.68 -0.99)
0．25 93.6%;κ,0.87
(95% ci 0.766 -0.98)		 91.0%;κ,0.82
(95%置信区间0.69 -0.495)
0.5 100.0%;κ,1
(95%置信区间1.00 -1.00)		 98.7%;κ,0.97
(95%可信区间0.92 -1.00)

表1:在三种不同的诊断阈值下，建筑师PCT检测与Elecsys和Vidas PCT检测的一致性和kappa值的百分比进行比较

精度研究

表2列出了对结果的总结。3个PCT浓度水平对照的平均分析内和分析间不精密度分别为3.49%和1.25%

水平 N Intra-assay Inter-assay
的意思是 简历(%) 的意思是 简历(%)
l 25 0．20 3.16% 0．20 1.13%
米 25 1.96 1.68% 1.96 0.90%
H 25 68.41 5.62% 68.41 1.73%
平均 3.49% 平均 1.25%

表2:Architect PCT分析的精度数据

讨论

降钙素原是诊断细菌感染和预后的有用检测方法，通常与血液培养或痰培养等其他检测方法一起用于诊断败血症或呼吸道细菌感染[10,11,2]。此外，监测PCT浓度将为抗生素治疗提供指导，并可能在不影响患者预后的情况下减少抗生素的使用。这对于重症监护病房的危重病人尤为重要。

在这项研究中，评估了新的自动化Abbott Architect PCT分析的性能。本方法与Vidas和Elecsys PCT两种标准方法进行比较。三种检测方法的测量间隔不同，Architect为0.02 ~ 100 ug/L, Vidas为0.05 ~ 200 ug/L, Elecsys为0.02 ~ 100 ug/L。Architect与Elecsys的总体偏差为-0.1 ug/L, Vidas为-0.5 ug/L。在0.05 ~ 24 ug/L之间，与Architect和Elecsys的分布差异不显著。当PCT浓度低于10 ug/L时，Architect和Vidas的差异不大，而当PCT浓度高于10 ug/L时，观察到负偏差。然而，根据目前的诊断界限，这一微小的差异并不会对细菌感染的诊断产生实质性影响。

我们的比较结果表明，不同试剂和技术在不同的相关诊断阈值(0.1,0.25和0.5 ug/L)下表现出相当的性能。特别是，在0.5 ug/L的诊断临界值上的一致性非常好，这反映了进展为严重全身感染的中度风险。这类患者应在6-24小时内密切监测临床和复查PCT水平，但我们在本研究中发现，不同方法测量的PCT水平存在显著偏倚。因此，PCT测量不应与其他监测患者的方法互换使用。

在PCT分析方法的实验室选择中，成本是需要考虑的重要因素之一。Architect PCT检测的校准需要在30天的重新校准频率中重复运行6个校准器。当实验室运行低量的样品时，可能会有额外的试剂校准成本。

本研究存在一定的局限性，建筑师PCT分析的分析范围(0.02 -100 ug/L)没有得到充分评价，样本仅覆盖在0.05 - 24 ug/L之间，大多低于5 ug/L。我们在本研究中发现PCT在25 ug/L以下具有良好的相关性，然而，高降钙素原(>100 ug/L)被认为是重症监护室不良预后的独立预测因素，包括败血症、创伤合并呼吸和循环功能不全的患者也有报道[12]。因此，应考虑进一步评价降钙素原高水平。此外，由于可用试剂数量有限，本研究未对Architect PCT检测的灵敏度、特异性和线性进行评估。

结论

我们的调查结果表明，新的雅培建筑师PCT分析与Vidas和Elecsys PCT方法相比具有良好的相关性。然而，不同方法之间的不同偏差表明，最好使用相同的免疫分析进行纵向患者监测。总之，雅培建筑师PCT分析法适用于临床常规诊断，用于PCT测量。


工具书类

  1. Dipalo M, Guido L, Micca G, Pittalis S, Locatelli M, et al.(2015)自动降钙素原免疫分析的多中心比较。实用检验医学2:22 -28。［Ref。］
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  3. Schuetz P, Christ-Crain M, Müller B(2007)生物标记物提高全身感染的诊断和预后准确性。Curr Opin Crit Care 13: 578-585。［Ref。］
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  12. (2017) 188例血浆降钙素原高水平患者临床特征及预后分析。华中科技大学学报，29:613-618。［Ref。］

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条信息

文章类型:研究文章

引用:梁文杰，侯慈，黎荣华。(2017)一种新的自动化Abbott Architect原降钙素检测方法与Biomerieux Vidas和Roche Elecsys方法的比较。临床检验医学杂志2(2):doi http://dx.doi.org/10.16966/2572-9578.117

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出版的历史:

  • 收到日期:2017年8月11日

  • 接受日期:2017年9月25日

  • 发表日期:2017年9月29日