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研究文章
抗氧化和抗炎潜能的转录评价科里亚布赫菌对乙酰氨基酚引起的亚慢性肾和肝毒性

Fakoya一奥卢索拉奥*

生物化学科学学院，Adekunle Ajasin大学，翁多州，尼日利亚系

*通讯作者：Olusola AO，尼日利亚翁多州阿德库勒·阿贾辛大学理学院生物化学系，电话:8035129957;电子邮件:austinolusola@gmail.com

摘要

本研究的目的是评价黄芪乙醇提取物可能的肾和肝保护作用科里亚布赫菌与n -乙酰半胱氨酸比较，亚慢性剂量扑热息痛对Wistar大鼠肝脏和肾脏基因表达的影响。将40只wistar大鼠分为8组，每组5只。第1组仅给予正常饲粮作为对照(CTRL)。2 ~ 6组给予14.28 mg/kg体重的扑热息痛(PM)。6 h后，第3组给予体重为200 mg/kg的提取物(E1)，第4组给予体重为400 mg/kg的提取物(E2)，第5组给予体重为70和150 mg/kg的n -乙酰半胱氨酸(E2)。7组和8组分别饲喂200和400 mg/kg体重的提取物(E1和E2)。这个时间表维持了90天。

动物被献祭;取肝、肾进行基因表达分析。结果表明，与对照组(1组)相比，马蹄莲提取物可下调肾脏fas配体、KIM-1、interlukin-6和前列腺素的表达科里亚布赫菌与对照组(1组)相比，肝组织中GST、GPX-1、CYP1A2表达下调科里亚布赫菌上调肝脏GST、GPX-1和CYP1A2基因的表达。与PM组相比，E1组GST表达显著增加(p<0.033)。与对照组相比，PM治疗组GPX-1水平下降。然而，与PM处理组和对照组相比，PM+E1处理组的水平增加。综上所述，马子醇提物具有较高的抗氧化和抗炎作用，可减少肝、肾细胞凋亡，解毒。这些活性可以解释为肾和肝的保护作用。因此，提取科里亚布赫菌种子可以作为治疗对乙酰氨基酚毒性的解毒剂。

关键字

解毒;基因的表达;肾和王亚南;防治作用;对乙酰氨基酚中毒


介绍

扑热息痛，也称为扑热息痛，是一种用于治疗轻度至中度疼痛的药物。与阿片类止痛药结合使用，扑热息痛也可用于癌症等严重疾病和术后疼痛[1]。也可用于治疗下腰痛；头痛和牙痛[2]。扑热息痛没有明显的抗炎作用[3]。它有时被用作疼痛和发热的一线治疗，在多模式镇痛[4]中发挥着重要作用，并且被认为具有良好的安全性，除了明显过量外，几乎没有药物相互作用。其影响持续2至4小时[2]。成人建议的最大每日剂量为3或4克[5]。高剂量可能导致肝毒性。

n -乙酰半胱氨酸(NAC)是一种含有氨基酸的硫醇，临床应用已超过30年，主要作为对乙酰氨基酚过量的解毒剂[6,7]。NAC是谷胱甘肽(GSH)合成途径的前体，其潜在的保护功能与预防以谷胱甘肽(GSH)降低和/或氧化应激增加为特征的慢性疾病(如酒精性肝病)有关[8,7]。作为巯基的来源，NAC支持谷胱甘肽- s -转移酶(GST)的活性，这是一个重要的II相解毒酶。此外，由于NAC与ROS直接相互作用，它被认为可以促进解毒并作为自由基的清除剂[9,7]。NAC是一种针对单一大剂量对乙酰氨基酚的保护药物，对于过度暴露、慢性暴露或重复超治疗暴露，几乎没有证据指导风险评估和最佳治疗[10,11]。

肝脏是人体的重要器官，由多种细胞组成，发挥着重要的功能。它是一个多功能和高度再生的器官。肝细胞是肝脏的主要代谢细胞类型，在药物过量时很容易受到损害。无论是急性期还是慢性期，肝脏损伤都会对健康造成严重后果。肝损伤是由药物不良反应引起的，可导致药物诱导肝损伤(DILI)。这给患者、临床医生、制药业和监管当局带来了重大问题。对乙酰氨基酚过量引起的肝损伤是西方国家急性肝衰竭(ALF)的主要原因，占ALF病例的近一半[13,14]。肝脏中的CYP450酶，特别是同亚型如CYP2E1, CYP3A4和CYP1A2，代谢对乙酰氨基酚为n -乙酰-对苯并醌亚胺(NAPQI)，一种肝毒性代谢物[15]。NAPQI结合细胞蛋白，特别是线粒体蛋白，触发细胞内信号级联，最终导致肝坏死[16-18]，发现2,3,4 '，5-四羟基二苯乙烯-2- o -β- d -葡萄糖苷(TSG)是何首乌的主要活性化合物。该植物具有抗炎、抗衰老、降血脂、降压、心脏保护和神经保护等多种药理作用[19,18]。 Liver mRNA expression of CYP1A2 was increased in mice treated with different doses of TSG (100, 200, 400, 800 mg/kg) for 12 hrs. It was found that TSG exacerbated acetaminophen-induced liver injury at the first time. Furthermore, the study showed that TSG augmented acetaminophen-induced liver injury by increasing the expression and catalytic activation of liver CYP1A2. TSG was seen to increase the expression of CYP1A2 in mice and in human normal liver and thus exacerbates the hepatotoxicity. It was further shown by Xu S, et al. [18] that Aryl Hydrocarbon Receptor (AHR) and Pregnane X Receptor (PXR) are responsible for up- regulating the transcriptional expression and activity of hepatic CYP1A2 in mice. AHR or PXR inhibitors were found to reduce the expression and activity of hepatic CYP1A2 and CYP3A4 in mice. According to Jóźwiak-Bebenista and Nowak [20], acetaminophen is a weak COX-2 inhibitor. A result obtained by Soliman MM, et al. [21] also showed that curcumin modulates the inflammatory response by down-regulating the activity of cyclooxygenase-2 in acute liver injury induced by acetaminophen. In a research conducted by Jurenka JS [22], curcumin modulated the inflammatory response by downregulating the activity of COX-2. This shows that curcumin is an antiinflammatory substance [22,23].

肾元是肾脏的基本结构和功能单位，它过滤血液以调节废物的再吸收和排泄，从而产生尿[24]。有毒化学物质和药物可引起肾毒性[25]。大多数药物的肾毒性作用在已经遭受肾脏损害的患者中更为深刻。肌酐清除率降低表明肾功能不佳，这在临床评估早期肾病患者时可能更有用。

科里亚布赫菌（奇妙的科拉）是一种常绿灌木，属于卡帕里达科[26]。在许多热带国家发现，如加纳、加蓬、喀麦隆、中非共和国、刚果、安哥拉、尼日利亚等[27]。卡帕里达科植物的乙醇提取物科里亚布赫菌Engler种子在实验性感染黑色素瘤的小鼠中具有抗锥体细胞活性锥虫属brucei(28日,26)。还发现该植物具有抗疟原虫[29]、抗菌[30,26]、杀幼虫[31]、抗疟原虫和抗腹泻[32]、镇痛[33]和驱虫[34,31]等特性。

Anowi及其同事之前的研究[32]表明科里亚布赫菌引起其表现出协同作用与降血糖剂，​​二甲双胍降血糖作用。此外，研究进行探讨植物化学成分和致病精彩可乐的叶提取物的抗菌活性金黄色葡萄球菌菌株。采用琼脂孔扩散法测定马氏乳蚧提取物的抑菌活性，确定抑菌区域和最低抑菌浓度(MIC)[35]。植物化学分析表明，该植物的叶片科里亚布赫菌含系统丹宁、碳水化合物、蛋白质、单宁、皂苷、生物碱和类黄酮。醇提物(10 ~ 14 mm)和甲醇提物(13 ~ 15 mm)对黄斑病菌的抑菌效果不同金黄色葡萄球菌这表明科里亚布赫菌植物能抑制病原菌金黄色葡萄球菌[35]。

最近，有证据表明，由于其安全性和较低的副作用，特别是与合成药物[36]相比，药用植物的使用逐渐引起人们的兴趣。本研究旨在评价其基因调控作用科里亚布赫菌种子给予推荐剂量的扑热息痛3个月，并评估亚慢性剂量的扑热息痛给药对肝脏和肾脏的影响

材料和方法
设备和实验室仪器

聚合酶链反应(PCR)机(Multi-gene optimax)，热循环仪(Multigene optimax，美国)，冰箱，Eppendorf管，干燥器，台式离心机(Biofuge，德国)，分光光度计(JENWAY，英国)，凝胶电泳机(美国)，微吸管，光电泳(美国)。

化学药品和试剂

N-乙酰半胱氨酸、溴化乙锭、示踪染料、异丙基乙醇、对乙酰氨基酚（GSK扑热息痛）、主混合物（新英格兰生物实验室）、RNA snap试剂盒（裂解溶液）、三硼酸EDTA（新英格兰生物实验室）、琼脂糖凝胶粉（英国克里夫科学有限公司）、引物（南非因卡达生物技术工业（私人）有限公司），无核酸酶水（英国生命科学先进技术公司），逆转录酶（新英格兰生物实验室），随机引物（新英格兰生物实验室），dNTPs（新英格兰生物实验室）。所有使用的化学品和试剂均为高分析等级。

植物材料的采集

的种子科里亚布赫菌是在Ondo州Ikare Akoko的Oja Oba市场购买的。

样品鉴定

种子通过指定的凭证编号025进行了识别和认证科里亚布赫菌尼日利亚Ondo州Akungba Akoko (AAUA)的Adekunle Ajasin大学植物科学与生物技术系的Engler树植物和代金券样本已保存在该大学的植物标本室。

准备样品

鲜籽b . coriacea都是用水洗的。洗过的种子被小心地切成薄片。将切好的种子在室温下风干几周，然后粉碎。

提取过程

将500克清洁、风干和粉碎的植物样品称重到萃取罐中，并将1400 ml分析级乙醇添加到含有乙醇的罐中科里亚布赫菌．将萃取混合物定期不断搅拌并放置72小时。上清液滗出，用旋转蒸发器在40℃下浓缩，冷冻干燥。提取液装入气密的样品瓶中，在冰箱内4°C保存，待需要时再取出。

动物

正常雄性Wistar大鼠40只(40只)购自Oyo州伊巴丹大学，在良好环境下驯化4周。这些动物是按照尼日利亚Ondo州Akungba Akoko的Adekunle Ajasin大学科学系动物实验资源护理和使德赢vwin首页网址用委员会的指导方针进行饲养和使用的。

实验设计

40只雄性Wistar大鼠用于本研究。这些动物被随机分为八组，每组五只大鼠。驯化后，第1组仅接受正常饮食作为对照（CTRL）。第2-6组服用14.28 mg/kg体重的扑热息痛（PM）。6小时后，第3组给予200mg/kg体重的提取物（E1），第4组给予400mg/kg体重的提取物（E2），第5组和第6组分别给予70和150mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。第7组和第8组分别只接受200和400 mg/kg体重的提取物（E1和E2）。这一时间表维持了90天。

动物献祭和组织切除

在90天治疗期结束时，将动物禁食过夜，然后处死。将肾脏和肝组织样本切除到含有100μl RNA snap试剂盒试剂的Eppendorf试管中。将组织匀浆，并将上清液储存在-4°C的冰箱中。

基因表达协议

半定量聚合酶链式反应方案用于确定以下的相对基因表达：GST，GPX-1，COX-1，IL-6，KIM-1，前列腺素合成酶，Fas配体有轻微的修改[37]。

基因表达分析

使用TRIzol（Invitrogen）提取总组织RNA根据制造商的协议。将RNA颗粒重新悬浮在二乙基/焦碳酸酯处理的去离子水中。通过琼脂糖凝胶电泳分析RNA样品，并通过在紫外光下观察完整的18S和28S rRNA来确认完整性。分光光度研究（NanoDrop，Thermo Scientific 2000c）用于确认总RNA的纯度，然后测定其浓度。1-2μg RNA在42°C下反转录为cDNA，持续60分钟。酶失活后（95°C，10分钟），使用相关基因的基因特异性引物将cDNA片段扩增35个周期。PCR产物在2%琼脂糖凝胶上解析，并使用Uvitec凝胶记录系统（Uvitec ArminTeb，伊朗）进行可视化。通过使用Uvitec Fire Reader软件（剑桥）进行统计分析进行基因表达研究比较各组。

后果

亚慢性剂量醋氨酚预处理肝脏的基因表达结果

CYP1A2和COX-2基因在肝脏中的相对表达量，与基础对照组和阴性对照组比较，各组基因表达量均无显著差异(p≥0.05)，见图1和图2。

图1：的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肝脏CYP1A2基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

图2：的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚中毒预处理（亚慢性）阶段Wistar大鼠肝脏COX-2基因表达的影响。
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

GST基因在肝脏的相对表达量，组给予200 mg/kg体重b . coriacea提取液中GST基因表达显著上调(p<0.05)。其余各组与基础对照组和阴性对照组比较，基因表达水平无显著差异(p>0.05)，见图3。

图3：的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肝脏GST基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对给予亚慢性剂量醋氨酚的大鼠肝脏中Fasl基因表达的影响如图4所示。下调的统计显著性差异（p<0.002）当服用14.29 mg/kg体重的醋氨酚和200 mg/kg体重的阿司匹林时，观察Fasl基因表达水平科里亚布赫菌是比较基础和阴性对照组。此外，有时将组与14.29毫克/千克体重的对乙酰氨基酚和400mg / kg体重的治疗下调（P <0.033）的显著统计学差异科里亚布赫菌是只有基础组相比。在其它基团，有在FASL基因的表达没有差异显著。

图4：的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肝脏FasL基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

如图5所示，有显著下调（P <0.002）在GPX-1的相对基因表达时，阴性对照，用基础对照组进行比较。该基团与治疗14.28毫克/千克乙酰氨基酚和400mg / kg的提取物，200和400mg / kg的提取物进行了比较，基础对照，有显著（P <0.002）在向上GPX-1基因的水平调节。该组与14.28毫克/千克乙酰氨基酚治疗的结果显示当与E1和E2组相比显著下调（P <0.002）。剩余的基团并没有表现出任何统计学显著差异（p> 0.05）当与基础对照组比较。

图5：的影响科里亚布赫菌提取液和n -乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚毒性作用前(亚慢性)期Wistar大鼠肝脏GPX-1基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

肾脏基因表达的结果与对乙酰氨基酚的剂量亚慢性预处理

的影响科里亚布赫菌与n -乙酰半胱氨酸相比，提取液对肾脏CYP1A2基因表达的影响如图6所示。两组CYP1A2表达水平与基础对照组和阴性对照组比较，差异无统计学意义(p>0.05)。

图6：的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚中毒预处理（亚慢性）阶段Wistar大鼠肾脏CYP1A2基因表达的影响。
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重B coriacea,E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

肾脏中GST基因的相对表达如图7所示。服用200mg>kg体重的组b . coriacea提取物显示GST基因显著上调（p<0.001）。与基础对照组相比，p+E1和p+E2组显示出显著下调（p<0.002）。无统计学意义（p>0.05）当所有剩余组与基础组和阴性对照组进行比较时，观察到基因表达水平的差异。

图7：的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肾脏GST基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

的影响科里亚布赫菌图8-10所示为亚慢性剂量对乙酰氨基酚对大鼠肾脏中GPx-1、fas配体和白细胞介素-6基因表达的影响。与基础对照组和阴性对照组相比，各组基因表达水平均无显著差异(p<0.05)。与基础对照组相比，PM+E2组表达显著下调(p<0.002)。

图8:的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚中毒预处理（亚慢性）阶段Wistar大鼠肾脏GPX-1基因表达的影响。
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店，E2=400mg/kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

图9:的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚中毒预处理（亚慢性）阶段Wistar大鼠肾脏FasL基因表达的影响。
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

图10:的影响科里亚布赫菌提取物和N-乙酰半胱氨酸对对乙酰氨基酚中毒预处理（亚慢性）阶段Wistar大鼠肾脏IL-6基因表达的影响。
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

的影响科里亚布赫菌与N-乙酰半胱氨酸相比，提取物对服用亚慢性剂量醋氨酚的大鼠肾脏中KIM-1基因表达的影响如图11所示。与基础对照组相比，KIM-1基因和PM+E2组的表达显著下调（p<0.002）。然而，KIM-1基因和PM+E2组的表达显著上调E2组KIM-1基因的表达水平（p<0.001），其余各组差异无显著性（p>0.05）。

图11:的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肾脏KM-1基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P <0.05，土耳其事后检验，* P <0.033，** P <0.002，*** P <0.001。

图12显示了科里亚布赫菌比较n -乙酰半胱氨酸对前列腺素合成酶基因表达的影响。与基础对照组相比，PM+E2组前列腺素基因表达显著下调(p<0.002)。其余各组基因表达无显著差异(p < >0.05)。

图12:的影响科里亚布赫菌对乙酰氨基酚预处理(亚慢性)对Wistar大鼠肾脏Ptgds基因表达的影响
PM=对乙酰氨基酚14.28 mg/kg体重，E1=对乙酰氨基酚200 mg/kg体重科里亚西亚酒店， E2= 400mg /kg体重科里亚西亚酒店，N1=70 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸，N2=150 mg/kg体重的N-乙酰半胱氨酸。
P<0.05, Turkey post hoc test, 95.00% CL * P< 0.033， ** P< 0.002， *** P< 0.001。

讨论

肝脏是人体的主要器官，具有一系列对健康至关重要的功能[38]。药物的使用：尤其是那些由合成物质合成的药物确实对肝脏和肾脏等器官有衰弱作用，这些器官的主要功能是代谢外源性物质并排出其代谢废物[39]。急性、亚急性、亚慢性和慢性剂量的药物已知对健康有害，因为它们对这些内脏器官有不良影响。

对乙酰氨基酚是一种解热药，用于治疗头痛、炎症和发热。尽管对乙酰氨基酚具有多种用途，但其过量服用已被证实会影响肾脏和肝脏[40]。取而代之的是，可用于治疗对乙酰氨基酚毒性的药物的开发引起了人们的注意，部分原因是其可用性和滥用趋势。

从植物中提取的天然药物的开发，已经引起了研究人员和制药公司的关注。这是因为，与合成的[41]相比，来自植物的植物化学物质更便宜，保留时间更短，生物可利用性更强。的提取b . coriacea在传统上被用来治疗某些疾病。近年来，对其在药物过量中毒治疗中的应用前景进行了阐述。b . coriacea在此研究相比，N-乙酰半胱氨酸作为标准药物治疗对乙酰氨基酚的毒性已被使用。植物提取物和N-乙酰半胱氨酸对肝脏和肾脏的一些基因表达的影响进行了调查，以确定B.龟的提取物对乙酰氨基酚亚慢性行政的生化作用。

与对照组相比，仅使用对乙酰氨基酚治疗组的GST基因（图3）有少量抑制。这种抑制可能是由于N-乙酰基-p-苯醌亚胺（NAPQI）（对乙酰氨基酚的代谢物）与谷胱甘肽（GSH）反应的结果因此，亚慢性剂量的对乙酰氨基酚可能导致肝细胞中GSH的消耗[43,21]。这与Daniel D等人[44]的报告一致大型水蚤一个21-23天的接触后，对乙酰氨基酚（一浮游动物microcrustacean在淡水环境中）。他们的数据显示，GST活动出人意料地下降。在GST活动中观察到亚洲蛤一个显著下降，蚬fluminea短期和长期服用对乙酰氨基酚[45]。Henderson CJ等[46]显示，暴露于对乙酰氨基酚后，大鼠肝脏中对乙酰氨基酚代谢的主要GST亚型——GST Pi显著降低。gst可能不是该药物[44]解毒的主要机制。管理b . coriacea单独提取(200 mg/kg b.w)可上调GST mRNA的表达。这反过来会导致体内谷胱甘肽水平的增加，从而增强细胞保护。亚慢性给药对乙酰氨基酚提取物可导致GST基因轻微上调。在Somanawat K和同事[23]的一项研究中，姜黄素已被筛选为具有肝保护特性，通过恢复因醋氨酚过量引起的肝毒性的肝谷胱甘肽来对抗雄性小鼠的肝损伤。姜黄素具有抗自由基介导的氧化应激作用。姜黄素可以通过增加对乙酰氨基酚所致肝毒性中GST的mRNA表达来清除自由基并改善抗氧化剂的消耗。因此，乙醇提取物b . coriacea在亚慢性剂量的醋氨酚中毒后，通过增加肝组织中GST的mRNA表达来阻断GSH的消耗，也可能具有类似的抗氧化能力。服用醋氨酚提取物显著降低GST基因表达（图7）这可能是因为提取物无法逆转对乙酰氨基酚对GST基因的抑制作用，因此无法探索肾脏细胞保护的另一种方法。根据Franco R等[47]，GST基因的表达必须在正常肾脏中上调，以便能够解毒有害物质。然而，200 mg/kg体重提取物处理组肾脏中植物提取物的作用结果表明GST基因上调。因此，该剂量的红豆树提取物能够诱导GST基因表达增加，用于肾脏有害化学物质的解毒。

从我们的研究结果，乙醇提取物科里亚布赫菌可能具有抑制肝脏CYP1A2转录表达和活性的能力，如图1和6所示。该提取物可通过抑制CYP1A2 (PM+E1和PM+E2组)的过度表达来缓解对乙酰氨基酚诱导的毒性。然而，在本研究中，对乙酰氨基酚并没有促进CYP1A2的mRNA表达。这可能是它涉及并可能诱导CYP的其他亚型代谢对乙酰氨基酚为NAPOI。

从我们的结果，可以看出，乙醇提取物b . coriacea与醋氨酚相比，可能是COX-2 mRNA表达的弱抑制剂(图2)，因为COX-2在治疗组之间的表达没有显著差异。然而，该植物可能具有抗炎活性(PM+E1，图2)，这可能是组内COX-2基因表达轻微下调的原因。Ogechukwu UB .[48]等人研究表明，布赫兹亚马子(奇妙的科拉)甲醇提取物具有抗炎活性。在肝硬化、肝炎等肝病中，可以观察到COX2基因的上调。对乙酰氨基酚治疗诱导COX-2水平的mRNA表达变化一致。然而，在严重的炎症失控的情况下(如关节炎或其他慢性炎症疾病)，它会导致疼痛和不适。在单独的提取物组(E1和E2，图2)中发现了轻微(不显著)的CYP1A2基因上调。这可能是一种试图保护身体免受可能的炎症，身体自我愈合的正常、健康尝试。

据报道，FasL的可溶性形式在免疫细胞[50]中具有凋亡和促炎活性。在本研究中，亚慢性剂量对乙酰氨基酚单独给药，与正常对照组相比，引起Fas配体mRNA表达轻微增加(图4和9)。这表明亚慢性剂量对乙酰氨基酚可能导致肾脏损伤，研究表明，Fas与FasL的连接导致caspase级联的激活，从而引发细胞凋亡，这种凋亡发生在正常细胞衰老或细胞损伤[51]的结果。合并施打subchronic剂量对乙酰氨基酚的提取(PM + E1和PM + E2组,图4和图9)造成重大的镇压(p < 0.033)的mRNA的表达Fas配体,尽管如此,其他组无显著差异(图4和9)。这与调查由Ogechukwu乌兰巴托,et al .[48]。结果表明，甲醇提取液和水提取液具有较好的抗氧化活性b . coriacea具有类似的抗炎活性。这些结果也与Wang Q和[52]合作研究柚皮苷对凋亡相关基因表达水平的影响相一致，其中柚皮苷处理可显著降低肾脏fas配体基因的表达水平。因此，在本实验的基础上，用提取液进行处理b . coriacea通过抑制FasL基因，可以有效地减少导致细胞凋亡的肝、肾细胞损伤。

管理科里亚布赫菌仅提取前用对乙酰氨基酚治疗引起GPX-1基因（PM + E1，PM + E2，E1和E2;图5）的一个显著上调。因此，植物显示，补充的潜力和GSH的体内抗氧化衰减损耗。据Morsy MA等。[53]具有姜黄素以降低由四氯化碳引起的动物的CCl4效应的能力，并且还通过黄曲霉毒素B [54]诱导的姜黄素降低肝毒性。姜黄素增加GPX，衰减的抗氧化剂耗尽的mRNA的表达，并从乙酰氨基酚过量引起的毒性[21]保护肝脏。据指出，去皱姜黄素具有针对小鼠中对乙酰氨基酚引起的急性肾损伤和去皱姜黄素的肾保护效果可通过增加抗氧化酶的量和减少对小鼠对乙酰氨基酚诱导的损伤[55脂质过氧化来解释很强的保护作用]。然而，对乙酰氨基酚的影响，科里亚布赫菌提取液和n -乙酰半胱氨酸对大鼠肾脏GPx-1基因表达的影响差异无统计学意义(图8)科里亚布赫菌已被描述为自由基清除剂[56]。这项研究的结果表明，红豆树提取物增加了GPx-1的mRNA表达，减少了抗氧化剂的消耗，保护肝脏免受对乙酰氨基酚诱导的毒性，并有效防止了对乙酰氨基酚可能导致的肾毒性。

先前有报道称，大鼠因顺铂引起的肾损伤而显著诱导KIM-1 mRNA的表达[57]。同样，在本研究中（图11），科里亚布赫菌能抑制对乙酰氨基酚所致大鼠肾损伤诱导的KIM-1 mRNA表达。我们可以得出结论科里亚布赫菌可能对预防醋氨酚毒性引起的肾病有效。但是，单独服用400 mg/kg提取物（E2，图11）会导致KIM-1基因过度表达。这可能意味着更高剂量的科里亚布赫菌提取物不一定是有毒的，也不一定是促氧化剂。

对乙酰氨基酚被归类为轻度止痛剂[2]，没有显著的抗炎活性[58]。对乙酰氨基酚治疗组的前列腺素合成酶基因水平较正常对照组略有升高(图12)。科里亚布赫菌能够抑制前列腺素基因mRNA的表达(PM+E2，图12)。科里亚布赫菌因此具有抗炎特性（图12）。在本研究中，N-乙酰半胱氨酸没有改变正常对照组前列腺素合酶基因的表达（图12）。这与Dimari J等人的研究一致。[59]，临床试验表明N-乙酰半胱氨酸补充谷胱甘肽储备，清除羟基自由基，并具有抗炎特性，这在Ancha HR及其同事的研究中得到了证实[60]在TNBS诱导的大鼠结肠炎中，NAC抑制前列腺素合成酶的表达以控制其值。结果显示，前列腺素合成酶基因的表达模式显示科里亚布赫菌提取物对病肾有生理作用。的提取b . coriacea可作为一种天然的强效抗炎剂和辅助剂，是治疗肾损伤的一种较好的修复药物。这与Xing C-Y等[61]的研究结果一致，地塞米松和维生素D抑制IL-6基因的表达，这在一定程度上解释了其抗炎作用。IL-6基因在正常肾脏的表达降低，因为它促进肾脏炎症。研究表明，乙醇提取物b . coriacea叶子被证明具有抗炎潜力，这可能是由于单独或共同作用的植物化学成分，正如在一些用提取物处理的组中所看到的[62]。科里亚布赫菌提取物已被证明具有更高的抗氧化和抗炎性能[63]。从我们的结果来看，使用对乙酰氨基酚和400 mg/kg的布荷尔齐亚coriacea提取物（图10）治疗组的下调可能描述了b . coriacea作为一种有效的抗炎剂。

结论

基于目前的研究，科里亚布赫菌证明对乙酰氨基酚具有抗氧化和抗炎的保护能力。科里亚布赫菌seed在作为有效的细胞保护剂用于治疗醋氨酚诱导的肝肾毒性之前，可以研究其可能的抗基因毒性和生物安全性。

确认

我们非常感谢尼日利亚Ondo州立阿昆巴阿科科的Adekunle Ajasin大学科学系生物计算和药物开发中心(CBDD)的所有研究人员，感谢他们在这项研究工作中给予的支持。


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文章信息

文章类型：研究文章

引用：Fakoya A，Olusola AO（2020年）的抗氧化和抗炎潜力的转录评估科里亚布赫菌在对乙酰氨基酚诱导的亚慢性肾和肝毒性中。J Biochem Analyt Stud 4（3）：dx.doi.org/10.16966/2576-5833.124

版权：©2020 Fakoya A，等人。这是在创意公约归因许可的条款下分发的开放式文章，其允许在任何媒体中不受限制地使用，分发和再现，只要原始作者和来源被记入。

出版历史：

  • 收到日期:2020年9月1日

  • 接受日期:二零二零年十月十六日

  • 发布日期：2020年10月23日,