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研究文章
植物化学的研究和体外大豆抗氧化和降血糖活性的评价猕猴桃deliciosa(答:Chev。)C.F. Liang & A.R. Ferguson(猕猴桃)

Vivek Kumar DhimanVivek Chauhan.沙姆谢尔·辛格·坎瓦尔

印度喜马偕尔邦大学生物技术系

*通讯作者:印度喜爱邦大学生物技术系Shamsher Singh Kanwar,电话:+ 91 8219994569;电邮:kanwarss2000@yahoo.com

抽象的

的水果猕猴桃deliciosa(A.切夫)C.F.Liang&A.R.Ferguson,猕猴桃也被称为“中国的奇迹水果”和“新西兰的园艺奇迹”,是一种非常有名的水果,具有良好的生物活性,具有良好的健康属性,如健康的皮肤,通过抗氧化剂和猕猴桃中的5-羟色胺含量改善睡眠。它还保持作为猕猴桃的心血管健康和血压是钾、纤维和抗氧化剂的良好来源。抗氧化特性有助于抗衰老和血液净化活动,而抗高血糖化合物可能导致抗糖尿病作用。本研究的目的是研究猕猴桃A的生化成分。通过对猕猴桃提取物在两种溶剂(乙醇和甲醇)中的化学分析表明,猕猴桃提取物中含有类固醇、强心苷、萜类、黄酮类和碳水化合物。使用1,1-二苯基-2-苦味酸酰肼(DPPH)进行抗氧化能力测试自由基抑制,而α-淀粉酶抑制试验是使用来自米曲霉.猕猴桃甲醇提取物(猕猴桃deliciosa)具有最高抑制活性出两种提取物的(相比于乙醇提取物)对DPPH自由基和α淀粉酶。我知道了50计算了猕猴桃甲醇提取物(MKE)和乙醇提取物(EKE)的值。我知道了50用于MKE的DPPH自由基清除测定的值为4.2±0.073mg / ml,持续3.14±0.153mg / ml冷杉eKE。另一方面,α-淀粉酶测定IC50MKE为1.53±0.158 mg/mL, EKE为2.05±0.639 mg/mL。动力学分析表明,EKE和MKE对α-淀粉酶表现出竞争抑制模式。在这项研究中,猕猴桃被证明对健康有益,因为它的提取物中发现了抗氧化和抗高血糖的特性。

关键字

猕猴桃deliciosa方丈;DPPH;α-淀粉酶;IC50价值;植物化学筛选;抗氧化能力;降血糖


介绍

猕猴桃是猕猴桃属中世界闻名的水果(猕猴桃科)。猕猴桃是一种雌雄异株植物,广泛分布于亚洲。原产于中国,但大多数品种在中国西南部种植。如今,许多国家都种植猕猴桃,尤其是意大利、新西兰、中国、智利、法国、希腊、日本和美国。猕猴桃由属于甾体、三萜类、黄酮类、醌类、多糖和苯丙烷类,如β-谷甾醇、豆甾醇、亚洲酸、阿糖醇酸、9'-顺式紫黄质、脱镁叶黄素b、脱镁叶黄素q、环氧化叶黄素、吡咯喹啉醌、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和植物抗毒素[1-3].果实、种子、茎和根天然具有利尿剂、天然血液稀释剂、解热和镇静特性[4]。据报道,猕猴桃对治疗类风湿性关节炎、肝炎、水肿、牙龈炎、脓带等疾病有益。研究表明,猕猴桃具有免疫调节和抗癌活性[5,6].在挪威进行的一项研究表明,每天食用2-3个猕猴桃,持续28天,可以替代阿司匹林疗法,并可以显著稀释血液。因此,它有助于降低血栓风险和降低血液中的脂肪,而脂肪是导致血液阻塞的主要原因[7]。

根据许多研究,摄入猕猴桃植物产品可降低患慢性病的风险,而慢性病与具有抗氧化活性的化合物有关[8]。类胡萝卜素和维生素E通过猝灭单线态氧,有助于第一防御系统抵御氧化应激[9]。这些抗氧化剂共同作用,减少对生命系统有害的自由基或活性氧[10]。此外,猕猴桃的甲醇提取物在脂肪细胞分化和功能中显示出脂肪生成的调节作用,这对预防糖尿病非常重要[11]考虑到猕猴桃的一系列药用价值,本研究旨在检查猕猴桃中存在的植物成分。然而,一些植物成分,如强心苷,在以前的研究中尚未被量化,猕猴桃的抗糖尿病效力也未被量化猕猴桃deliciosa因此,对其抗氧化活性和α-淀粉酶抑制活性进行了研究猕猴桃deliciosaChev。对果实粗提物进行测定,确定其有益健康的性质。

材料和方法
植物材料

水果猕猴桃deliciosa2019年10月,Chev从印度猕猴桃园(30°.51.44 N;77°.0932 E;1290 AMSL)获得果园学博士,美国园艺园艺学院副院长Nauni Solan博士(Nauni Solan)(Nauni Solan),所有样品均在低温条件下(0℃)下洗损坏。

化学药品和试剂

DPPH和α-淀粉酶米曲霉自Sigma-Aldrich公司,St.Louis,USA采购了,而淀粉可溶物(分析级)从HIMEDIA实验室私人获得。有限公司,印度孟买。其他化学品和试剂均为分析纯和使用水的玻璃蒸馏。

猕猴桃提取物的制备

猕猴桃deliciosaChev。整个猕猴桃用水清洗以去除所有污染物,然后用70%的乙醇清洗表面。水果被称量后,用搅拌器磨成细颗粒。然后将该浆料(每个14克)以1:25 (w/v)的比例分别浸泡在350 ml选定的溶剂(70%乙醇和70%甲醇)中。所有样品在黑暗条件下浸泡48 h。两种浆料(乙醇猕猴桃提取物:EKE;甲醇猕猴桃提取物:MKE)在30°C下持续振荡(200 rpm) 48小时。然后,混合物的内容物通过一个细布过滤,最后通过Whatman 1号滤纸。萃取溶剂在30°C减压下在旋转真空蒸发器中蒸发,直到样品无溶剂。将干燥后的残渣称量,并将其原液放入蒸馏水中。 The yield (percentage) was calculated using the following equation:

产率(%)=(提取物初始重量(g)/浓缩提取物最终重量(g)×100。

醇提物保存在冰箱中,用于抗氧化活性测定和植物化学分析。

猕猴桃提取物(EKE和MKE)的植物化学初步筛选

植物化学成分A.美味Chev。采用不同的方法测定果实中酚醇的含量。用2% (w/v)氯化铁溶液滴几滴处理提取物(EKE和MKE)。蓝黑色颜色的形成表明存在酚类[12]。在水果提取物中加入几滴莫里施试剂,然后在试管壁上慢慢地加入浓硫酸。一个红紫色的环表明在测试样品[13]中存在碳水化合物。用1.0 ml氯仿对提取物进行处理,然后沿试管两侧滴几滴浓硫酸。间相呈红褐色,表明存在萜类化合物[14]。用几滴乙酸酐处理提取物,摇匀后加入1.0 ml浓硫酸,颜色由紫色变为蓝绿色,表明存在类固醇[15,16]。提取液用1.0 ml冰醋酸处理,混合均匀,加入几滴5%乙醇氯化铁溶液,摇匀,缓慢加入1.0 ml浓硫酸。 An appearance of a brownish ring between the two layers with lower acidic layer turning blue-green upon standing indicated the presence of cardiac glycosides [17,18]. Extracts were treated with 1.0 ml of Wagner’s reagent, mixed well, added 1% (v/v) hydrochloric acid. The reaction mixtures were incubated in hot water bath for 5 minutes. Appearance of precipitate in the reaction mixture indicated the presence of alkaloids [19]. Extracts were also treated with 1.0 ml of 10% (w/v) sodium hydroxide solution. The yellow colouration which appeared later turned colorless upon addition of dilute acid indicated the presence of flavonoids [20].

猕猴桃提取物(EKE和MKE)植物化学成分的定量测定

总黄酮含量测定方法:总黄酮含量A.美味Chev。使用Stankovic Ms等,使用Stankovic Ms等的比色测定测量粗果提取物。[21]。将已知体积(1.0mL)的提取物(EKE和MKE)加入到10mL容量瓶中,然后加入0.15ml 5%(w / v)亚硝酸钠2.5分钟后,加入2% (w/v) 0.15 ml氯化铝。进一步,6分钟后,用1.0 ml的1 M NaOH溶液中和反应混合物,用蒸馏水使总体积达到10 ml,混合均匀,并在510 nm处进行分光光度监测。黄酮含量以每毫克新鲜物质中槲皮素当量的微克表示。

类固醇的定量估计:体内总甾体激素的含量A.美味Chev。粗水果提取物根据由帕特雷A,等人报道的方法来确定。[22]。每个猕猴桃提取物(1.0毫升,EKE和MKE)转移到10ml容量瓶中,然后加入2.0毫升4N硫酸和2.0ml的0.5%(W / V)铁(III)氯化物。加入0.5毫升的0.5%(W / V)铁氰化钾(III)溶液加入反应混合物。在加热水浴集反应混合物在70±2℃30分钟以恒定的振荡和将内容物用去离子水稀释。吸收在780nm处被针对试剂空白测定。使用环木菠萝烯醇作为标准在猕猴桃提取物测定类固醇的含量。总类固醇含量表示为每新鲜材料的毫克当量环木菠萝烯醇微克。

心脏糖苷的定量测试:心脏总糖苷含量A.美味Chev。用Muhammad SA等人开发的比色法测定粗果提取物。将8毫升猕猴桃提取物(EKE和MKE)转移到100毫升的容瓶中,然后加入60毫升去离子水和18毫升12.5% (w/v)醋酸铅,混合好并过滤。然后,将50 ml滤液转移到另一个100 ml烧瓶中,并加入8 ml 47% (w/v)单磷酸二钠沉淀过量铅2+离子。内容物混合良好,并完成了最后的卷与去离子水。混合物用同一滤纸过滤两次,以除去多余的磷酸铅。将10ml滤液转移到干净的Erylen-Meyer烧瓶中,用10ml Baljet试剂处理。用10 ml蒸馏水和10 ml Baljet试剂进行空白滴定。将这种混合物静置一小时,使其显色完全。颜色强度在495 nm处用比色法测量,公式如下:

苯酚-硫酸法定量测定碳水化合物:酒精饮料中总碳水化合物的含量A.美味Chev.使用尼尔森[24]的改良方法测定水果粗提取物。将等分的猕猴桃提取物(2.0 ml,EKE和MKE)加入含有5%(w/v)苯酚(2.0 ml)的两套试管中,将内容物充分混合,缓慢添加5 ml浓硫酸并旋转内容物。让反应混合物静置10分钟,然后在25°C下培养10分钟。再次旋转混合物并在490 nm处测量吸光度。使用葡萄糖测定提取物中的总碳水化合物含量作为对照化合物,表示为每毫克新鲜物质的葡萄糖当量微克。

抗氧化试验

免费自由基清除活性:的DPPH(1,1-二苯基-2-苦基肼)的自由基清除能力A.美味Chev。采用Rajurkar NS, et al.[25].方法测定粗果提取物。DPPH (4mg / 10ml)原液(100mm)按1:10的比例稀释。在不同试管中加入0.5 ml DPPH原液,然后增加猕猴桃提取物的浓度(10-100 mg/ml)。加入去离子水,最终体积为1.0 ml,孵育30 min517.)在紫外可见分光光度计上对照试剂空白。自由基清除活性以DPPH在样品/化合物存在下的吸光度降低来测定。通过样品与空白样品的吸光度差来估计DPPH自由基清除能力,以DPPH清除率表示。DPPH自由基被还原时的紫色变色程度表明抗氧化剂[26]清除自由基的能力。反应混合物剧烈旋转,然后在37°C的热水浴中孵育1小时,之后a517.对反应混合物进行记录。抗氧化剂通过提供氢来清除自由基,形成稳定的DPPH分子,从而使自由基的颜色由紫色变为黄色,因此吸光度降低。槲皮素作为参考分子用于参考图谱的校正。

猕猴桃提取物的清除率(%)=(C腹肌- S.腹肌)/C腹肌×100

C =一个517.S=A517.测试样本的数量。

的集成电路50通过线性回归分析计算出猕猴桃提取物的抗氧化能力(使DPPH自由基减少50%的提取物浓度)。

阿尔法淀粉酶抑制试验:在体外α -淀粉酶抑制试验参照McCue PP, et al.[27]方法进行。共200μl的A.美味Chev。取水果粗提物(20- 100mg/ml)置于试管中,加入20mM磷酸钠缓冲液(pH 6.9)中制备的α -淀粉酶溶液(0.5mg/ml) 200μl。在25℃预孵育15min后,加入2 mM磷酸钠缓冲液(pH 6.9)制备的1% (w/v)淀粉溶液200 μl。混合物在25°C进一步孵育10min。在反应混合物中加入500μl的二硝基水杨酸(DNS)试剂终止反应,然后试管在滚水中孵育5min,室温冷却。用蒸馏水代替水果提取物制备对照品。最后用5ml蒸馏水和A稀释反应混合物540值记录。α -淀粉酶抑制活性计算为:

的集成电路50值(导致酶活性的50%抑制提取物的浓度)使用指示猕猴桃提取物的抑制潜力的线性回归分析计算。

集成电路的计算50的集成电路50对每个样本按以下程序计算:

抑制率(y)和样品浓度(x)相互对照绘制。分别绘制回归线,得到回归方程(y=mx+c)。回归方程中,样品浓度(x)在y=50处计算。这个计算值被设置为IC50每个分析样品的(mg/ml)值。

α-淀粉酶抑制方式:A.美味切夫。根据Ali H等人改进的方法,将粗水果提取物(EKE和MKE)用于α-淀粉酶抑制的动力学研究[28]。将总计250μl猕猴桃提取物与250μlα-淀粉酶溶液(0.5mg/ml)在20 mM磷酸盐缓冲液(pH 6.9)中在25°C下在一组试管中预孵育10 min。在另一组试管中预培养250μlα-淀粉酶。向反应混合物中添加250μl淀粉溶液,以增加浓度(0.30、0.90、1.50、2.50和5.0mg/ml)向两组反应混合物中添加淀粉溶液,以开始反应。在添加500μl DNS后,在25°C下培养10min的反应混合物煮沸5min。每种情况下释放的还原糖的量都是通过分光光度法测定的540用麦芽糖标准曲线与反应速度换算如下:

活性(U =毫摩尔/分钟/毫升)= S腹肌- B.腹肌/标准腹肌- b腹肌×浓。性病/培养时间X n/MW麦芽糖

其中S=样品,B=缓冲液,Std=标准,浓度=浓度,n=稀释系数,MW=分子量。

双倒数图(1/V°1/[S]),其中V是反应速度,[S]是底物浓度。抑制的类型或模式以及反应的动力学参数A.美味Chev。采用Michaelis-Menten动力学双倒数(lineweaverburk)图分析果实提取物对α-淀粉酶活性的影响。动力学参数通过调整曲线到Lineweaver-Burk动力学方程来计算:

1 / V =(K/ V马克斯) (1/ s) + 1/ v马克斯

淀粉-琼脂凝胶扩散试验:淀粉琼脂板(含有可溶性淀粉0.5%琼脂2.5%)中制备[29]。五个孔中,随后加入30微升各含有EKE和MKE(60,80和100mg / ml)处理α淀粉酶的增加的浓度在反应混合物中的的所述板的琼脂培养基中冲压;阳性对照含有在磷酸钠缓冲液阿尔法α淀粉酶(0.5毫克/毫升)和仅含有缓冲液的阴性对照。将板温育过夜扩散至在20℃下发生,随后检测和使用碘溶液淀粉水解区的测量。

统计分析

使用Microsoft excel进行统计分析。所有结果均以Mean±SE表示。p≤0.05为显著值。

结果与讨论
果实原料制备及提取物得率

考察溶剂萃取特定成分的效率,每种特定生化成分的得率A.美味Chev。测定水果提取物。的A.美味Chev。水果提取物在EKE(3.47g)和MKE(1.66g)提取物中产生24.83和11.8%的MKE的产量。杨H,等。[30]报道7.9%和8.6%的乙醇提取物(W / W),而4.1和13.0屈服级分(乙酸乙酯和正丁醇)的产率(w / w)猕猴桃deliciosa猕猴桃果皮分别。现有调查评估了不同类型溶剂对来自各种植物零件的生物活性化合物的影响,例如水果,叶子和种子[31]。有趣的是,目前研究企图的提取程序似乎比早先的调查相当有效。提取的残余物量和产率的变化主要取决于良好溶剂的使用,毒性较小,传质,较低的沸点和防腐作用。此外,确定提取过程效率的其他基本因素是提取物的类型,温度和提取时间[32]。

定性分析

主要植物化学物质的调查:初步来说,,猕猴桃deliciosaChev。采用水果粗提物通过化学分析对各种次生代谢产物进行初步的植物化学筛选(表1)。两种醇提物的植物化学分析表明,类固醇、心脏苷、萜类、黄酮类化合物和碳水化合物均存在。已经对猕猴桃进行了一些研究,以确定其生物活性化合物[33-38]。EKE和MKE提取物对大部分植物成分的存在具有积极的结果。

植物化学物质 化学测试 Methanolic提取 Ethanolic提取
类黄酮 氢氧化钠测试 + +
萜类化合物 Salkowaski测试 ++ +
类固醇 利伯曼今后的
测试
++ ++
碳水化合物 莫氏利施的测试 ++ ++
强心甙 凯勒-基拉尼试验 + +
丹宁酸 氯化铁测试 - -
生物碱 瓦格纳的测试 - -

表1:美味猕猴桃的定性植物化学分析。
+表示存在植物化学物质
++表明了植物化学物质的存在
-表示缺乏植物化学物质

定量分析

总黄酮含量:黄酮类化合物是植物中最重要的次生代谢产物,具有多种生物活性和抗氧化作用,在制药、医药、营养和化妆品等领域被认为是不可缺少的。黄酮类化合物的含量A.美味在亚硝酸钠和氯化铝反应过程中,通过黄酮-铝络合物的形成来测量Chev.水果提取物。根据UV-Vis信号(Y=0.007x+0.159;R=0.001),使用槲皮素分析曲线(10-100μg/ml)计算EKE和MKE中的总黄酮含量(TFC)2= 0.982)。的determination of the TFC of EKE and MKE extracts (100 mg/ml), expressed as quercetin equivalents (µg/mg), established flavonoid abundance in methanolic extract (0.37) than that of ethanolic extract (0.28). Fiorentino A, et al. [38] quantified TFC inA.美味简历。海沃德粗提取物。它们的分析报告了极性提取物中大量的黄酮类化合物(儿茶素当量; 131.7至108.9mg / 100g水果重),而非极性提取物显示有限或没有结果。TFC(儿茶素当量; Mg / 100克水果重)答:kolomikta(69.05),答:arguta(188.43)和A. Chinensis.(67.63)用铝比色法测定,结果为3猕猴桃按递减顺序提取答:arguta>答:kolomikta>A. Chinensis.[40]。黄酮类化合物的质谱研究A.美味果实提取物表征了柚皮素、槲皮素、tricin、山奈酚、槲皮素、槲皮素、槲皮素、槲皮素-3-O-β- d -葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β芦丁苷、芦丁、表儿茶素、儿茶素和没食子儿茶素[38]等11个类黄酮分子。

总甾类内容:类固醇是胆固醇衍生的、亲脂性的、低分子量的化合物,用于许多食品添加剂、化妆品和各种药品的配方成分。植物甾醇A.美味在浓硫酸存在下,Chev.水果提取物与三氯化铁和六氰亚铁酸钾反应,生成一种粉红色的络合物,其强度与存在的甾体数量成正比。EKE和MKE中的甾体总含量(TSC)(100 mg/ml)使用环青蒿醇分析曲线计算(4-28μg/ml)基于UV-Vis信号(Y=0.0029x+0.107;R2= 0.9989)。与甲醇提取物相比,表达为环戊烯醇等同物(μg/ mg)的eKe和MKE提取物(100mg / ml)的TSC,表达为环戊烯醇等同物(μg/ mg),与乙醇提取物相比,在乙醇提取物中建立了更高的类固醇含量(13.50)(12.58)。然而,已经进行了有限的研究来估计Actinidia水果的总类固醇含量。Fiorentino A等人。[38]特征在于7种植物甾醇A.美味“海沃德”有机水果提取物鉴定为豆甾醇、β-谷甾醇、樟脑甾醇、豆甾醇-7-en-3β-醇、麦角甾醇及其过氧化物衍生物和5,7,14,22-麦角甾醇四烯-3β-醇通过GCMS分析。这些植物甾醇有助于在降低血胆固醇水平的和作为化学预防剂,以抑制癌发生的方法。

总强心苷含量:强心苷是用于治疗心肌梗死、某些不规则心跳和各种心脏相关疾病的几类药物或药物之一[42]。猕猴桃富含强心苷,其总强心苷含量以EKE和MKE(100 mg/ml)估算[23]。与乙醇提取物(3.7μg/mg)相比,甲醇提取物显示出更高的强心苷含量(4.7μg/mg)。然而,先前的研究仅对猕猴桃果实中的强心苷进行了初步检测,而没有对其含量进行检测。

总碳水化合物含量:碳水化合物有助于大多数食物的甜味、外观和质地。除此之外,每种食物都有碳水化合物“指纹”、营养成分、特性和其他各种因素。因此,测定碳水化合物的含量是十分必要的。采用10 ~ 90 μg/ml葡萄糖分析曲线(Y=0.0047x + 0.438;R2=0.9638)和苯酚-硫酸比色法测定。浓硫酸将多糖、双糖和寡糖分解成单糖。戊糖脱水成糠醛,己糖脱水成羟甲基糠醛。这些化合物与苯酚反应时呈现金黄色。EKE和MKE提取物的TCC (100 mg/ml)以葡萄糖当量(μg/ mg)表示,甲醇提取物中甾体含量(0.24)高于乙醇提取物(0.22)。Deters AM等人[43]研究了猕猴桃多糖的摩尔组成通过气相色谱/质谱分析鉴定了中华鳖中9种不同类型的碳水化合物:鼠李糖、果糖、核糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和糖醛酸。

抗氧化(DPPH自由基清除活性)测定

DPPH自由基清除活性是分析特定化合物或植物提取物[44]抗氧化活性的一种敏感方法。的决心A.美味通过测量其清除DPPH自由基的能力来研究水果的抗氧化性能。DPPH是一种自由基,当其位于抗氧化剂分子附近时,很容易被清除,该抗氧化剂分子在一定温度下表现出最大的吸光度517..清除自由基的能力为DPPH•的百分比还原能力。两种醇提取物都具有剂量反应清除能力和较强的百分比降低能力。MKE的清除活性最高(%)(72.16%)。EKE的清除活性为61.16%。DPPH自由基测定结果表明,所有提取物都能大量清除目标种的自由基。观察到的集成电路50(提取物的浓度导致DPPH自由基的50%)值(表2)显示,与乙醇提取物(4.2±0.073mg / ml)相比,甲醇提取物表现出最强的抗氧化活性(3.14±0.153mg / ml)。IC较低50值越大,样品的抗氧化活性越高。采用ABTS法和FRAP法测定了5个猕猴桃品种果实的抗氧化能力,其抗氧化活性在9.40 ~ 21.36之间(ABTS法),在0.87 ~ 9.22之间(FRAP法)。以前的研究强调,乙醇提取物A.美味果的抗自由基作用比正己烷和乙醚提取物更强A.美味水果[38]。

提取 我知道了50(mg / ml)
甲醇 3.14±0.153
乙醇 4.2±0.073

表2:我知道了50美味雪梨的价值。果实提取物采用DPPH法测定。
数值表示为三次试验的平均值±SEM(P≤ 0.05).

α-淀粉酶抑制测定

人类胰腺α-淀粉酶(E.C.3.2.1.1)是消化系统中的一种关键酶,负责将淀粉分解成低聚糖混合物,如α(l-6)、α(1-4)低聚葡聚糖和麦芽三糖;双糖,如麦芽糖和适合吸收的单糖[45].α-淀粉酶的抑制对非胰岛素依赖型糖尿病(2型糖尿病)的治疗特别有用,因为它会减缓葡萄糖的吸收[46,47]。在目前的研究中ActinidiadeliciosaChev。研究了猕猴桃醇提物对α-淀粉酶的催化活性。对提取物效果的外推表明,对α-淀粉酶的抑制作用呈剂量依赖性,最终浓度为100 mg/ml时,MKE对α-淀粉酶的抑制作用(85.16%)强于EKE(79.76%)。的集成电路50(表3)MKE(1.53±0.158 mg/ml)显著低于EKE(2.05±0.639 mg/ml) (p≤0.05)。因此,降低集成电路50表明对酶的抑制作用更强。在两种不同浓度的EKE和MKE存在下,通过Lineweaver-Burk曲线确定动力学参数,这表明酶活性受到竞争性抑制(图1),表明Kα-淀粉酶在萃取物上为0.722mg / ml淀粉,分别低于1.010mg / ml和0.998mg / ml的MKE和EKE。wojdeła,等。[37]评估IC50(Mg干果/ ml)α-淀粉酶的5种不同品种的α-淀粉酶的值范围为4.13至6.62。以前的研究表明,对α-淀粉酶的强抑制作用和Kiwifruit提取物的自由基清除性能,因此其抗血糖和抗氧化能力[37,47,48]。然而,在研究中发现表明,本发明的类黄酮类化合物,槲皮素-3-O-葡糖苷,Kaempferol-3-O-Rutinoside和Kaempferol-3-O-葡糖苷的表现在α-淀粉酶上具有高抑制作用[49]。目前,研究表明,活性成分A.美味Chev。水果提取物与酶活性部位的底物结合竞争。猕猴桃提取物对α-淀粉酶有较强的抑制作用。这一结果与之前的研究一致,即微生物对未消化的碳水化合物的发酵导致胰腺α-淀粉酶的广泛抑制导致结肠的不规则性。因此,温和的α-淀粉酶抑制是可取的[50]。不同猕猴桃对α-淀粉酶抑制作用的研究很少。然而,猕猴桃比柚子、橘子、橙子、香蕉、菠萝、柚子、红葡萄柚和苹果[47]表现出更强的抗高血糖活性。

提取 我知道了50(毫克/毫升)淀粉酶
甲醇 1.53±0.091.
乙醇 2.05±0.368.

表3:我知道了50α -淀粉酶抑制能力的测定。提取物。
数值表示为三次试验的平均值±SEM(P≤ 0.05).

图1:抑制方式的线织-伯克图α淀粉酶通过EKE和MKE。

淀粉琼脂试验

淀粉琼脂凝胶扩散试验显示猕猴桃提取物的抑制作用呈阳性(图2)。猕猴桃的抗糖尿病作用也被证实为[51]。最近的研究表明,早餐时吃猕猴桃可以显著减缓葡萄糖释放到血液中的速度。此外,植物化学分析显示猕猴桃的糖含量较低,这与之前的报道一致,表明低血糖指数有利于调节血糖[53,54]。

图2:用MKE和EKE处理α-淀粉酶(0.5 mg/mL)后的淀粉琼脂平板(a)阳性对照(b)阴性对照(c)60.0 mg/mL(d)80.0 mg/mL和(e)100.0 mg/mL。

结论

猕猴桃是一种营养丰富、热量低的高营养食品。全世界都将其作为沙拉、果汁或零食食用。在本研究中,植物化学分析提供了猕猴桃成分的概念猕猴桃deliciosaChev.,(猕猴桃)。后来,通过确定其抗氧化和抗高血糖作用来检查水果的药用性质。猕猴桃对健康改善的贡献可能与其抗氧化能力有关。维生素C、胆碱、玉米黄质和叶黄素是主要的抗氧化剂,有助于清除体内在不同代谢过程中产生的自由基。抗高血糖化合物用于治疗糖尿病。研究表明,猕猴桃提取物具有良好的抗糖尿病潜力。未来的研究应基于确定总抗氧化能力、抗氧化剂的含量猕猴桃基因型和水果的抗糖尿病潜力猕猴桃因为(i)抗氧化剂的浓度在不同种类和亚种之间存在显著差异,(ii)获得不同猕猴桃的推荐消费和销售,这些猕猴桃可以作为丰富的膳食补充剂,也有助于治疗糖尿病。

致谢

这项工作得到了新德里科学和工业研究理事会的资助,并获得了CSIR-NET初级研究奖学金[文件No.09/237(0161)/2017-EMR-1],该奖学金授予了其中一位作者(VC)。作者感谢新德里CSIR和新德里DBT对喜马偕尔邦大学生物技术系的持续财政支持。

的利益冲突

作者声明他们之间或与母校之间没有利益冲突。


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条信息

文章类型:研究文章

引文:Dhiman VK, Chauhan V, Kanwar SS(2020)植物化学研究体外大豆抗氧化和降血糖活性的评价猕猴桃deliciosa(答:Chev。)C.F. Liang & A.R. Ferguson(猕猴桃)。J Biochem analysis Stud 4(1): dx.doi.org/10.16966/2576-5833.119

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出版的历史:

  • 收到的日期:2020年1月9日

  • 接受日期:2020年3月25日

  • 发表日期:2020年3月31日