摘要

背景:在有限的环境中，自身免疫疾病很少报告。我们旨在探讨Burkina Faso的自身免疫疾病的负担，免疫和临床诊断。

方法:我们在Souro Sanou大学医院患有疑似自身免疫性疾病的患者，于2012年至2012年间，Burkina Faso于2012年至2014年间为这项队列研究。人口统计学特征，临床表现，血清自身抗体测定和血浆病毒和细菌统计（HBV，HCV，HIV和Dengue血清型1,2,3和4，结核分枝杆菌和莱姆病)。所有的血浆样品被储存在- 80°C时，没有立即进行分析。

结果:在三年的研究期间，总共有65名怀疑自身免疫性疾病的患者被诊断。在有限环境国家(布基纳法索)的患者中，有17/65名患者(26.2%)的转诊诊断是正确的。自身免疫性疾病发生率为17/73950(0.023%)。系统性红斑狼疮(SLE) 4/73950(0.005%)，类风湿性关节炎(RA) 5/73950(0.007%)， CREST和多发性肌炎2/73950 (0.003% %)，CREST 2/73950 (0.003%)， Gougerot Sjögren综合征(SSG) 1/73950(0.001%)，桥本甲状腺炎2/73950(0.003%)，结节病1/73950(0.001%)。诊断自身免疫性疾病的中位年龄分别为51岁(28 -75岁)，男女比为0.06(1/16)。血浆病毒状态(HBV、HCV、CMV、HIV、莱姆病、登革热1、2、3、4血清型)均为阴性。结核分枝杆菌案例为3.07％）。免疫抑制剂的治疗再次自身免疫疾病在2/17患者中没有效率。

结论:转诊诊断正确者17/65(26.2%)。在限制环境的国家(布基纳法索)，发病率为17/73950(0.023%)。自身免疫疾病和感染之间没有显着的相关关系;自身免疫性疾病和卫生假设之间还没有显着关联。

关键词

自身免疫;疾病;自身抗体

缩写

ANA：抗核抗体;CENP-B：Centromere蛋白B;dsdna：双链DNA;ELISA：酶联免疫吸附试验;IFI：间接免疫荧光测定;Jo-1：组氨基-T-RNA合成酶;援助：自身免疫疾病;RNP70 A，C：小核核核核络合物;70 kda，a，c多肽scl-70：DNA拓扑异构酶I;SLE：Systemic Lupus erythematosus; SmD: Smith’s antigen (a family of RNA-binding proteins); SSA/Ro: Sjögren’s Syndrome A antigen/small ribonucleoprotein particle (Ro 52 and 60 kDa); SSB/La: Sjögren’s Syndrome B antigen/Lupus antigen, La ribonucleoprotein domain family, member 3 ; U1RNP: U1 nuclear ribonucleoprotein (mixture of recombinant RNP70, A, C); RA: Rheumatoid Arthritis; HT: Hashimoto Thyroiditis

介绍

自身免疫性疾病是一个具有不同自然病史和广泛临床症状的慢性致残疾病的异质性家族。这些疾病共享免疫反应的潜在缺陷，导致身体攻击自己的器官和组织。这些疾病大多不成比例地影响妇女;然而，所有种族、民族和社会经济群体的人都受到影响[1,2]。某些疾病，包括系统性红斑狼疮和硬皮病，在非裔美国人中更常见，而其他疾病，如1型糖尿病和多发性硬化症，在白种人中更常见。所有年龄的人都受到影响，发病时间从儿童到成年后期。虽然许多个体自身免疫性疾病很罕见，但总的来说，它们被认为影响了大约5%到8%的美国人口——1400万到2200万人[3-8]。由于自身免疫疾病的慢性(以几十年为单位)和使人衰弱的并发症，其医疗和社会经济成本很高。此外，由于自身免疫疾病影响妇女在其最多产的年龄，其对家庭和社会的影响可能是巨大的。虽然关于自身免疫性疾病的发病率、流行率以及医疗和经济影响的全面国家数据总体上不存在，或者就大多数自身免疫性疾病而言，但现有的统计数据清楚地表明，这些疾病的影响是重大的。 Some of the available data for specific diseases are highlighted below. The purpose of our study is to establish immunology and clinical strategies for enhancing autoimmune diseases diagnosis in the limited setting country (BURKINA FASO) were incidence, prevalence, morbidity, and mortality of autoimmune diseases remains undiscovered.

材料和方法

道德的声明

在我们的研究中分析的样品来自于医院咨询的患者。在我们的研究中注册的自身免疫疾病患者接受了单独或与另一种药物结合的有效免疫压缩机治疗。该研究由我们在Burkina Faso Ouagadougou的国家伦理研究综合委员会批准。参加本研究的患者给了书面知情同意。

患者和方法

我们前瞻性地纳入2012年1月至2014年11月期间在布基纳法索Bobo Dioulasso大学医院SOURO SANOU和另一家私人诊所进行自身免疫性疾病医学和免疫学诊断的患者进行队列研究。人口学特征、临床表现、血清自身抗体谱和血浆病毒和细菌状况(HIV/HBV/HBC/CMV/登革热血清1、2、3和4型)结核分枝杆菌/莱姆病)。

在我们的研究中，自身免疫性疾病的诊断是结合自身抗体血液测试-射线、临床表现和血液测试(测量营养功能和炎症)。此外，采用一种诊断标准来确认每个病例的自身免疫性疾病没有IFI方法;患者血清自身抗体谱是临床诊断的重要前提。事实上，ANA阳性和抗双链天然DNA (antidsDNA)或抗sm抗体的存在构成了系统性红斑狼疮(SLE) 11个诊断标准中的2个[2,9-11];高滴度ANA阳性或存在抗ro /SSA或抗la /SSB抗体为Sjögren综合征[10]的诊断标准;抗Jo-1抗体的存在是皮肤多发性肌炎的诊断标准[12,13];抗着丝点或抗拓扑异构酶I(抗scl70)抗体的存在是皮肤系统性硬化分型为局限性或弥漫性[9]的标准。

实验室试验

多重免疫滴度测定：我们使用免疫点试剂盒(生物医学诊断，法国)诊断自身免疫性疾病

• ENA-DOT 7套件定性酶免疫分析法(EIA)同时检测7种特异性抗体:针对可提取的核抗原(SS-A, SS-B, Sm, Sm/RNP和Scl70)，以及针对2种额外抗原(着丝粒和Jo-1)。
• ANCA-MBG-DOT工具包用于同时检测针对髓过氧化物酶（MPO）和丝氨酸蛋白酶（PR 3）的抗中性粒细胞凋亡抗体（ANCA）的定性酶免疫测定（EIA）。使用基于IV型的纯化抗原的抗肾小球基底膜（GBM）抗体。
• 阶段-DOT4工具包用于同时检测4对胞嘧啶器官剂的4个自动抗体特异性的定性酶免疫测定（EIA）（抗线粒体，抗-JO1，抗核糖体和抗-11）
• DNA-DOT工具包定性酶免疫分析法(EIA)用于检测针对(DNA原生)的抗DNA抗体。
• 抗原被包被在检测条带上的不同膜上;
• 首先，化验条在含有病人稀释样品的反应管中孵育。如果该样本中含有至少一种抗体，这些抗体将识别并与相应的抗原结合。在孵育后，第一步清洗除去所有未结合的蛋白质。
• 碱性磷酸酶标记的蛋白A结合到捕获的抗体。多余的未结合共轭物通过第二步洗涤除去。
• 结合的缀合物用磷酸酶（BCIP / NBT）的不溶性衬底可视化。这将产生蓝色圆圈，确认样品中的自动抗体存在。
• Anti-CCP采用两步免疫分析和自动样品预处理技术，使用嵌合发光微粒免疫分析(CMIA)技术和灵活的检测协议(chimiflex)半定量测定人血清中针对环瓜氨酸肽的Ig G类自身抗体。结果< 5 U/ml为阴性。Ig G和Ig M RF的测定采用嵌合发光微粒免疫分析(CMIA)技术，采用灵活的检测协议(chimiflex)。结果< 20 UI/ml的样品被定义为阴性。

筛查HIV，HBV和HCV：嵌合发光微粒免疫分析(CMIA)技术(ArchitectCI4100.^®)用于筛查HIV、HBV和HCV。

筛选CMV和莱姆病：酶联荧光分析(ELFA)技术(MiniVidas^®)用于巨细胞病毒和莱姆病的筛查。登革热血清型1、2、3、4、5和结核分枝杆菌采用免疫层析技术(Hexagon D^®和六边形结核病^®°)。

统计分析

采用Wilcoxon检验对数据进行分析。我们使用费舍尔(t)检验的百分比。未验证分布正态性时，采用非参数检验(Kruskal Wallis和Mann-Witney)。当p<0.05时，认为结果有统计学意义。使用STATA™进行分析。

结果

患者及基线特征

在研究期间的访问人数为73950，包括17例自身免疫性疾病。65例患者中有17例(26.2%)转诊诊断正确。发生率为17/73950(0.023%)。

表1显示了自身免疫疾病患者在研究队列中的人口统计学和临床​​特征。比较对自身免疫疾病的性别影响，女性更有可能具有自身免疫性疾病而非男性（P = 0.004）。分析自身免疫疾病与种族或种族和家庭年收入之间的相关性，没有观察到种族和家庭年收入的差异（P = 0.7）。

表1:研究队列患者的人口统计学和临床​​特征（n = 65）

抗HBV或HCV(乙型或丙型肝炎病毒)、HIV、CMV、包柔氏螺旋体burgdorferi在血清或唾液中发现的自身免疫性疾病，如SSG，SLE和PR。我们的研究中没有发现相关性（P = 0.3）。

自身免疫性疾病患者血清中炎症蛋白质谱

表2显示了研究队列中自身免疫性疾病患者血清中的炎症蛋白谱。分析蛋白质的不同部分，发现低白蛋白血症与自身免疫疾病有关(p=0.02)。因此高γ球蛋白血症与SLE有关，低γ球蛋白血症与桥本甲状腺炎有关。

表2:自身免疫性疾病患者血清中的炎症蛋白谱
拿拿淋:不适用

自身免疫性疾病患者血清中的自身抗体谱

表3显示了研究队列的自身免疫疾病患者血清中的自动抗体谱。比较自身免疫疾病类型的比例，发现我们的队列没有显着的统计学差异（p = 0.07）。

表3：自身免疫性疾病患者血清中的自身抗体谱

布基纳法索性别与自身免疫疾病之间的关系

在我们的研究中，女性在受影响的研究成员中占主导地位。总体而言，94.12%(16/17)为女性，5.88%(1/17)为男性。免疫点技术的敏感性和特异性分别为100%和57%。

正确使用和解释血清学检测诊断自身免疫性疾病对临床医生提出了挑战，原因有两个:首先，大多数自身免疫性疾病的实验室检测的敏感性和特异性明显低于100%，其次，使用不同的技术检测自身抗体，如间接免疫荧光或多重免疫点分析，给出不同的结果。

自身免疫性疾病比例与患者社会经济法规

表4显示了自身免疫疾病和患者的社会经济地位在我们的研究中的比例。比较妊娠对自身免疫病的影响发生，发现已经倍增的女性受到血上的影响更大（P = 0.002）。

表4：自身免疫性疾病的发病率和患者的社会经济法规

女性的年龄和自身免疫疾病

图1显示了妇女的年龄和自身免疫疾病。

图1:女性的年龄和自身免疫疾病

根据自身免疫性疾病的比较不同年龄比较，SLE和SSG分别为32.5岁和35年的年轻女性更频繁（KHI 2 = 5.30）。旧女性更有可能具有嵴（68岁），RA（60.4岁），HT（50岁）和嵴和聚肌炎（46.5岁）（KHI 2 = 3.72）。

讨论

自身免疫性疾病发病率

在本研究中，自身免疫性疾病的发生率非常低(0.023%)，除1例患者外，所有患者均为女性。在有限环境国家(布基纳法索)的患者中，有17/65名患者(26.2%)的转诊诊断是正确的。数据分析证实自身免疫性疾病发病率低。系统性红斑狼疮(SLE)为0.005%，类风湿性关节炎(RA)为0.007%，CREST及多发性肌炎为0.003%，CREST为0.003%，Gougerot Sjögren综合征为0.001%，桥本甲状腺炎为0.003%，结节病为0.001%。自身免疫性疾病在美国和欧洲人群中的患病率在4-10%之间[8,14-18]。考虑到自身免疫性疾病在美国和欧洲的患病率为4-10%，参考文献中所发现的0.023%的自身免疫性疾病是非常低的，这可能简单地说明还有很多其他的自身免疫性疾病患者没有被诊断出来。我们报告SLE和SSG在年龄分别为32.5岁和35岁的年轻女性中更为常见。老年女性患CREST(68岁)、RA(60.4岁)、HT(50岁)及CREST和多发性肌炎(46.5岁)的可能性较大。在自身免疫性疾病中发现的这种性别不平等往往是由于激素因素[3-8,19,20];抗体的产生和淋巴细胞的出现在女性比男性高[2]。 Indeed, in the mouse model of MS, experimental autoimmune encephalomyelitis in mice, disease severity is increased by castration in male mice diffuse and decreased by testosterone implantation in females diffuse [4].

Gonadal类固醇的免疫调节作用，特别是睾酮，可能使女性特异性与自身免疫疾病相关联。

我们还报道了与RA, SSG, HT, CREST/多发性肌炎和妊娠呈正相关。这些结果在许多研究中都有报道[12,13,21-24]。这表明，在怀孕期间从胎儿细胞通过胎盘的过渡，以及它们在分娩后在母亲体内的持续存在，在某些情况下会干扰免疫系统，这解释了经产妇女比那些只有一次怀孕的妇女更有可能患有自身免疫疾病。

在我们的研究中，我们发现卫生假说和自身免疫性疾病没有关联。在我们的研究中，年收入非常低(< 5760美元USA)。研究人类自身免疫性疾病风险与卫生程度的关系发现了许多关联[24]。

我们还研究了与RA，SLE，CREST / POLOMYTISIS，HT和感染剂（HIV，HBV，HCV，莱姆，莱姆病，登革热血清型1,2,3和4）与结核分枝杆菌和RA病例（3.07％）。

有可能是自身免疫性疾病及相关结核分枝杆菌感染可能调节免疫应答和ra风险，因为结核分枝杆菌和自身免疫疾病之间的一些观察到的相关性[1,2,9-13]。评估与之相关的风险是有意义的结核分枝杆菌人群中的感染结核分枝杆菌频率足够高(例如，非洲热带);也许更重要的是，在任何按性别划分的人口中。

然而，我们的发现与直接识别患者样本中带有临床症状的自身抗体是一致的。在限制条件国家，自身抗体的鉴定对自身免疫性疾病的诊断至关重要。临床医生可以使用这些结果作为对患者进行分类和/或评估他们对特定疗法的反应的指导，特别是在靶向生物疗法发展的情况下[12,13,21]。

我们的技术为基于多重检测的自身抗体定量提供了一种新的方法，与早期的方法如细胞系印迹试验和传统的一井一检测微滴酶联免疫吸附试验相比具有优势[3,22,23]。这些多重检测使使用单一平台和单一血清样本同时检测多种生物标志物成为可能。在本研究中，我们对AID患者中最常见的自身抗体的检测显示了不同水平的临床敏感性。

BMD测试^®允许从具有高特异性的单个血清样品（99.8％）平行测试七种抗原。该方法及时提供了大量节省，避免了目前用于辅助样品测试的大多数临床测试实验室的传统第一筛选和确认后算法。BMD仅需要20μL样品，并遵循与传统ELISA测定相同的步骤。BMD与低设置成本和快速样品处理时间一起，为当前可用的多路复用测试系统提供了实惠的替代品。这些节省成本的功能使得预算有限的小实验室可以在没有大量资本支出和实验室技术人员的情况下使用这项技术。BMD已经证明了出色的分析敏感性（100％），但特异性不良（57％），与已建立的ELISA测定相比[4,8,11]。此外，与线免疫测定相比，BMD表示患者临床管理的定量优势[25-28]。

结论

转诊诊断正确者17/65(26.2%)。在限制环境的国家(布基纳法索)，发病率为17/73950(0.023%)。自身免疫性疾病的发病率极低，可能是由于一些未确诊的患者。自身免疫性疾病与感染之间无显著相关性;自身免疫性疾病与卫生假说无显著相关性。

致谢

我们感谢大学医院的调查员，Bobo Dioulasso Burkina Faso博士（大学医院）为患有自身免疫性疾病和临床数据的患者提供患者。

作者的贡献

构思和设计了实验:Y Sourabié， Y Traoré， F Fumoux, M S Ouédraogo，和C Sirima

进行实验：YSourabié，YTraoré和M SOuédraogo

分析了数据：YSourabié和YTraoré

贡献的试剂/材料/分析工具：YSourabié，ytraoré和f fumoux，

写了论文:Y Sourabié， Y Traoré， F Fumoux, M S Ouédraogo和C Sirima

利益冲突陈述

我们声明我们没有利益冲突。

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条信息

文章类型:研究文章

引用:Sourabié Y, Bazié WW, I Sangaré， Sirima C, Ouédraogo MS, et al.(2016)有限环境国家(布基纳法索)自身免疫性疾病:用于早期诊断的特定生物标志物的流行病学、技术和诊断性能。自体免疫感染疾病2(2):doi http://dx.doi.org/10.16966/2470-1025.112

版权:©2016 Sourabié Y，等。这是一篇开放获取的文章，在知识共享署名许可协议的条款下发布，该协议允许在任何媒体上无限制地使用、发布和复制，前提是注明原作者和来源。

出版历史记录：

收到日期:2015年10月29日

接受日期:2016年3月26日

发表日期:2016年3月29日