摘要

西尼罗河病毒（WNV）自2014年以来一直是撒丁岛地区的地方病。2011年在撒丁岛报告了大量WNV感染病例，由于意大利其他地区的情况，该地区自2008年以来已经处于戒备状态。除了涉及野生鸟类和马科的病例外，还报告了四例人类病例，所有这些病例都是致命的。2017年7月，一例新的WNV感染病例通过检测患者脑脊液（CSF）和血液中的WNV抗体，在一名人类患者中诊断出了欧洲侵袭性西尼罗河病毒病（WNVD）。在确认WNV阳性后，动物园专业研究所（IZS）根据意大利昆虫学监测计划的建议，通过放置陷阱，对患者住所附近的蚊子进行了调查。一批蚊子对WNV检测呈阳性，这是首次在患者住所发现WNV。

关键词

西尼罗河人病例;伊蚊caspius；昆虫的监测

介绍

西尼罗河病毒(WNV)是一种神经嗜性病原体，属于日本脑炎抗原复合物家族黄病毒科属黄病毒［1］．西尼罗河病毒的生命周期包括有能力的蚊子和以野生鸟类为代表的宿主[2,3]。马和人被认为是西尼罗河病毒的“终端”宿主，因为它们的病毒血症水平较低，通常不足以感染蚊子，而且无法完成传播循环[4,5]。在意大利，1998年在托斯卡纳地区的马中报告了病毒传播的第一个证据[6,7]。自2001年以来，已经制定了一项国家兽医监测计划和人类监测建议，以便迅速发现西尼罗河病毒在马、鸟、蚊子和人体内的传播。该监测系统建立7年后，在此期间未发现病毒传播，2008年在威尼托和艾米利亚罗马涅大区发现了西尼罗河病毒，发现了西尼罗河病毒谱系1和2，甚至在同一地区共同传播。2008年9月至10月，在波河地区发现了第一例西尼罗河病毒人间病例，此前国家兽医监测计划对同一地区的马病例[8]发出警报。撒丁岛WNVD病例概述见表1。特别是这种疾病首次出现是在13岁^th2011年9月，在12月中旬消失，然后在2012年5月再次出现，就像马的临床病例一样。在此期间，有6例人类感染西尼罗河病毒病例。从以前的研究来看，最近流行的住院患者的死亡率在4 - 14%[9]之间。2011年期间，撒丁岛发生了4例西尼罗河病毒人间病例，其中2例与死亡结果有关:第一例西尼罗河病毒相关死亡病例发生在2001年11月，发生在7月住院的一名83岁男子中，第二例发生在9月住院的一名75岁男子中。10月，又有两名患者被诊断为WNVD，一名76岁，一名34岁，健康状况非常好。所有病例均发生在Oristano省，包括西尼罗河病毒54次非人类暴发(39匹马、14只鸟、1只蚊子);在奥尔比亚省只有一例人间病例。2012年，在奥里斯塔诺省记录了两例西nvd人间病例。2017年7月，一名老年患者出现脑膜脑炎和发热症状，最终被诊断为神经侵入性WNVD。本报告介绍了该疾病2012年在撒丁岛传播后的第一例人间病例和2017年在意大利的第二例病例。

年	马	鸟	蚊子	人类
2011	39	14	1.	4.
2012	10	8.	1.	2.
2013	1.	3.	1.	0
2014	0	0	1.	0
2015	0	4.	1.	0
2016	1.	4.	1.	0

表1:撒丁岛2011-2016年西尼罗河病毒病例。

案例展示

25日^th2017年7月，一名54岁的妇女被送往奥里斯塔诺的一家医院。既往有类风湿关节炎及过敏性哮喘病史。临床表现为构音障碍、失语。进行常规生化和血液学检查，脑扫描和神经咨询。住院后的第二天，脑电图显示头部受累，并进行腰椎穿刺。脑脊液检查结果:葡萄糖48 mg/dL(正常范围40 ~ 70 mg/dL)，蛋白质128 mg/dL(正常范围15 ~ 45 mg/dL)， Cl 127 mmol/L(正常范围118 ~ 132 mmol/L)。血清样本中葡萄糖浓度为108 mg/dL(正常范围:74-106 mg/dL)，总蛋白浓度为6.7 g/dL(正常范围:6.0-8.3 g/dL)。患者一般情况恶化，入院卡利亚里医院(体温36ºC;动脉压110/70);对血液和脑脊液标本进行西尼罗河病毒抗体检测。 Laboratory investigations for a possible diagnosis were carried out at the Regional Reference Laboratory in the Azienda Ospedaliera Universitaria of Cagliari on 26^th2017年7月。根据制造商的说明书，使用西尼罗河病毒IgM-IgG capturing DxSelectTM试剂盒进行抗体测试(FOCUS DIAGNOSTIC, California)。脑脊液标本(指标值为8.21)和血清标本(指标值为2.06;索引值:缺席，<0.8;边缘,0.8 - -1.1;现在,> 1.1)。两份样本均未检测到免疫球蛋白G (IgG)抗体，指标值分别为0.09(<0.8)和0.11(<0.8)。27日^th2017年7月（体温36.6℃）患者开始接受头孢曲松、奥美拉唑、依诺肝素、速尿和地塞米松治疗，并进行静脉输液治疗。如国家监测计划所示，阳性样本被送往卫生研究院（罗马）传染病部国家参考实验室，以确认检测结果[10]。血清和脑脊液样本通过WNV斑块减少中和试验（PRNT）进行检测，结果为PRNT50≥ 两种样品中的比例均为1:10。此外，使用相同的样本进行实时PCR，结果为阴性。这一结果提示最近发生了西尼罗河病毒感染。根据这些发现和患者的临床表现，患者于2007年7月27日被诊断为WNV所致脑膜脑炎^th2017年7月。直到30^th2017年7月，患者首次出现症状(AFS) 5天后，病情危重，表现为偏瘫、失语、意识水平严重下降、肌肉无力上升。AFS第6天，患者精神状况及一般情况有所改善。AFS第23天，患者下床活动改善;她的药物治疗被停止，她的血液样本被发现IgG抗体阳性(值2.14;指标值:正≥1.5;Dubbio≤1.50，≥1.30;- < 1)。病人在长时间住院26天后出院。

蚊子采集

根据WNVD国家监测计划，撒丁岛分发了36个用于昆虫监测活动的捕蚊器，其中4个位于Oristano省。该计划表明，当确认有人间病例时，这些活动必须加强。在确认西尼罗河病毒感染后，应立即进行额外的昆虫诱捕，以调查蚊子的存在，并确定与疾病传播有关的可能物种。在此基础上，于2017年7月31日在患者家的花园里放置了三种不同模式的诱蚊器。这些包括:a美国疾病控制和预防中心(CDC)用诱蚊灯从日出到日落收集不同种类的成年雌蚊，用BG Sentinel诱捕器(Biogents AG, Regensburg, Germany)捕捉白天活动的蚊子，用孕蚊诱捕器(BioQuip Products, Rancho Dominguez, California, usa)，对妊娠期雌蚊[11]有选择性。所有的捕鼠器都工作了48小时。根据鉴定关键字[12]，在形态特征的基础上对蚊种进行了性别鉴定。女性被定义为“充血”，如果她们含有新鲜摄入的血液，使腹部呈鲜红色; otherwise, they were considered “not engorged”. Mosquitoes were pooled according to date, species, sex, and type of trap, with a maximum of 25 specimens per pool.

结果，讨论和结论

共捕获蚊虫77只，隶属于6种:尖音库蚊(63标本),伊蚊caspius(6),白纹伊蚊(3)，库蚊theileri(3)，唇形按蚊（1） 及长齿库蚊（1） [13,14]。随后通过定量实时逆转录聚合酶链反应（qRT PCR）对每个蚊虫池进行检测，以同时检测WNV谱系1和2菌株[15]。在一个蚊虫池中检测到WNV卡斯皮乌斯监狱长包含四只未充血的雌性（表2）。RNA材料已发送至CESME（外来疾病参考中心）进行谱系研究，但不幸的是，样本不足以进行诊断试验。所有其他池对WNV均为阴性。尽管所有物种的丰度通常不相同，但在这种情况下捕获的物种数量与过去四年收集的物种数量相当[16,17].数据证实，最丰富的物种是残雪。侵害，与意大利其他地区类似，伊蚊是撒丁岛第二丰富的昆虫媒介。虽然是Ae。据报道，辣椒对WNV口腔感染具有中度敏感性，在如此少量的寻求宿主的雌性中检测到WNV是出乎意料和偶然的，因为该物种几乎完全以大型哺乳动物为食，这些哺乳动物通常是死端宿主，具有非常低的病毒血症[18,19]。根据监测计划，该物种多次被发现对Usutu病毒呈阳性反应，但在2008年仅两次对WNV、Emilia Romagna呈阳性反应，并且在这次人道爆发中首次在撒丁岛被发现[20]。

陷阱	种	数字	阶段	qRT-PCR
妊娠的陷阱	尖音库蚊	1.	环境足迹	负
BG哨兵陷阱	白纹伊蚊	1.	环境足迹	负
	尖音库蚊	2.	M	负
	尖音库蚊	4.	NE-F	负
美国疾病控制与预防中心光阱	白纹伊蚊	2.	M	负
	A.不属于鳃类	1.	NE-F	负
	尖音库蚊	20	M	负
	尖音库蚊	6.	M	负
	尖音库蚊	20	NE-F	负
	尖音库蚊	6.	NE-F	负
	尖音库蚊	4.	环境足迹	负
	库蚊theileri	3.	NE-F	负
	这是一个长乳晕	1.	NE-F	负
	伊蚊caspius	2.	M	负
	伊蚊caspius	4.	NE-F	积极的

表2:诱捕方法、池组成（种类；蚊子数量；阶段）和qRT PCR结果。NE=未充盈；I=充盈；F=雌性；M=雄性。

这个案例是一个很好的例子，说明了考虑将撒丁岛的小焦点区作为奥里萨塔诺省，以采取针对WND的具体控制措施的重要性，同时也强调了改进潮湿地区的监测活动和监测的必要性。此外，还强调了加强昆虫种群密度控制活动的重要性鉴于撒丁岛献血的严峻形势以及WNV通过血液和器官传播的实际风险，通过感染区域的血清学控制降低了WNV的传播风险，作者对此进行了ged。本病例报告由直接参与患者护理和昆虫学调查的临床医生编写，未提供任何鉴定患者同意发表这篇论文。

确认

作者感谢地方和地区卫生当局的合作。

参考文献

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条信息

文章类型:病例报告

引用:Stefano C，Sandro R，Maria CA，Federica L，Giorgio M，et al.（2017）西尼罗河病毒病在人类中的复发和意大利撒丁岛的连续昆虫学调查，2017年。动物科学杂志2（1）：dx.doi.org/10.16966/2576-6457.108

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出版历史：

收到日期:2017年10月23日,

接受日期:05年12月,2017年

发表日期:2017年12月13日